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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因有三个外显子，怎么样将该基因序列扩增出来而不含有内含子，在原核细胞中表达？
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caaslc

金虫 (小有名气)

[求助] 基因有三个外显子，怎么样将该基因序列扩增出来而不含有内含子，在原核细胞中表达？ 已有6人参与

求教各位大侠，如题：本人研究的绵羊MSTN基因有三个外显子，怎么样设计引物将该基因序列扩增出来而不含有内含子，从而在原核细胞中表达呢？
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对科研的评价，我用两个字概括：呵呵
1楼 2015-06-22 09:52:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
caaslc: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-06-22 11:22:23
将mRNA反转成cDNA后不就没有内含子了吗？然后设计引物克基因就行了。
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123456
2楼2015-06-22 10:28:00
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普通回帖

xiaomage9527

金虫 (正式写手)
2楼正解
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3楼2015-06-22 11:09:51
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ttgacataat

铜虫 (初入文坛)
请问楼主是什么专业的？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-06-22 21:21:33
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y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiqinger at 2015-06-22 10:28:00
将mRNA反转成cDNA后不就没有内含子了吗？然后设计引物克基因就行了。

同解
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5楼2015-06-22 22:23:42
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jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-23 22:01:53
先到NCBI知道该基因的ORF，成熟肽序列信息，然后根据NCBI给的序列设计引物。如果该基因在C端还有信号肽，你还要根据需要，考虑是否去除
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

caaslc
6楼2015-06-23 08:22:40
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caaslc

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ttgacataat at 2015-06-22 21:21:33
请问楼主是什么专业的？

动物遗传育种与繁殖，咋了？
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对科研的评价，我用两个字概括：呵呵
7楼2015-06-23 19:38:49
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caaslc

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by jukongka at 2015-06-23 08:22:40
先到NCBI知道该基因的ORF，成熟肽序列信息，然后根据NCBI给的序列设计引物。如果该基因在C端还有信号肽，你还要根据需要，考虑是否去除

他这样的话扩增出来的目的基因不是包含内含子了吗？我不是很了解，你能具体说一下吗？
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对科研的评价，我用两个字概括：呵呵
8楼2015-06-23 19:41:16
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刘芬玲

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用cDNA为模板进行扩增
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9楼2015-06-24 18:08:46
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以cDNA为模板扩增的就没有内含子

[ 发自小木虫客户端 ]
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10楼2015-06-25 00:22:21
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