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vsgz

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA链,条带都是中空的,怎么回事?已有4人参与

主要的条带都是中空的,就是上面有点带会稍稍体现。会是什么原因呢?

聚丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA链,条带都是中空的,怎么回事?
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yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一,量太大
第二,孔上样不匀称
努力打败一切
6楼2015-06-15 10:12:16
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

这种拖尾很正常,其实没有大碍
是尿素胶吗?跑胶前最好用移液枪吸取一些跑胶的缓冲液吹一吹上样的胶孔,有时会发现(特别是尿素胶)胶孔里其实有很多其他的半透明的东西被吹出来,条带的效果会好一些
如果条件允许,可以把电压调低,然后边跑胶边上样。不过现在有很多跑胶设备带个盖子,没办法边跑边上样
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2015-06-16 01:29:51
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普通回帖

dyzxzxy

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-15 22:45:21
DNA不纯,有杂质,另外就是配胶有问题,调整浓度,建议按照步骤重新配制,再做一遍,
在生物界混口饭吃的男人
2楼2015-06-12 15:45:13
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calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-06-15 22:45:38
我个人认为是凝胶的浓度不均匀,而且凝胶聚集的程度也不均匀,导致电流在凝胶中电流强度不均一,也可能与电泳的时间不适当有关系。
3楼2015-06-12 15:59:50
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vsgz

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dyzxzxy at 2015-06-12 15:45:13
DNA不纯,有杂质,另外就是配胶有问题,调整浓度,建议按照步骤重新配制,再做一遍,

可是同样的胶里,右边几个就没有中空,是不是合成的问题,按照1:1的比例合成的多条带,但是不能有效合成?
4楼2015-06-13 15:20:24
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602059625

金虫 (知名作家)

加尿素了吗
[url=http://ip.WoTuLa.com][img]http://i.WoTuLa.com/note.png?name=填写姓名&say=这里填写您想说的内容。[/img][/url]
5楼2015-06-14 00:55:23
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vsgz

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 602059625 at 2015-06-14 00:55:23
加尿素了吗

没有,一直没有加过尿素
8楼2015-06-16 16:41:14
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vsgz

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-06-16 01:29:51
这种拖尾很正常,其实没有大碍
是尿素胶吗?跑胶前最好用移液枪吸取一些跑胶的缓冲液吹一吹上样的胶孔,有时会发现(特别是尿素胶)胶孔里其实有很多其他的半透明的东西被吹出来,条带的效果会好一些
如果条件允许 ...

我还想请教一下,我的DNA Marker的标记与我的样品的碱基数目对应不起来,是怎么回事?例如,碱基数是220,在图上对应Marker是150左右。
9楼2015-06-17 19:48:48
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Albert_Ren

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yangjingjing at 2015-06-15 10:12:16
第一,量太大
第二,孔上样不匀称

高手!

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-06-17 20:23:34
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