应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 环境微生物RNA提取
51/1返回列表
查看: 3070  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

snowfling

新虫 (初入文坛)

[交流] 环境微生物RNA提取 已有5人参与

最近在提环境水体的RNA，采样方法为将水体微生物过在滤膜上，然后放在RNA later中进行保存。
提取过程使用了试剂盒和Trizol手工的方法，但是都出现了问题。

使用试剂盒时，在裂解液加乙醇溶解上柱的过程中出现了裂解液加乙醇分层的现象，感觉出现油状物分层。

使用Trizol提取的时候，将滤膜放在Trizol中裂解，裂解完离心，之后Trizol就分为了两层。现象如图所示~~

初步问了很多人，大家都是是RNA later溶液导致的这种现象
然后RNA就一直提不出来。

不知道大家提RNA的时候有没有遇到这种问题呢？出现之后提取效率会变低么？有没有什么好的解决方法呢？

环境微生物RNA提取
IMG_1219.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-05 15:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ChenYFSCAU

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我采用了qiagen的RNA protector提取革兰氏阴性菌的RNA，后续采用qiagenRNA提取试剂盒，提取到的细菌总RNA有降解，也是提了好多次都有降解，但是，不加protector之后抽提的RNA就没有降解现象了。
后面我就不加这个protector了，快速提取RNA之后赶紧进行反转录成cDNA。
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-22 16:15:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
RNA Later中的各种离子浓度很高，建议离心前加一些水再离。
赞一下 回复此楼
our story begins
2楼2015-07-24 11:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lenalee119

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也是从环境水体中提取RNA，也是先过滤在滤膜上然后提取。由于RNAlater会影响后续到RNA抽提，所以我有邮件问过TAKARA公司和 life technologies的人，都回复说建议先除去RNAlater后再进行RNA抽提。我最后的处理办法是每张滤膜上RNAlater只加20-50微升，这个量足以不使RNA分解，而又不会影响后续的试剂盒抽提或手工抽提（使用TAKARA公司的RNA试剂盒或和光制药的ISOGEN进行手工抽提都可以有效提取总RNA）。
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-16 13:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ypan

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用MP公司的试剂盒试一试
赞一下 回复此楼
4楼2015-09-28 15:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭