24小时热门版块排行榜    

查看: 2735  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

snowfling

新虫 (初入文坛)

[交流] 环境微生物RNA提取 已有5人参与

最近在提环境水体的RNA,采样方法为将水体微生物过在滤膜上,然后放在RNA later中进行保存。
提取过程使用了试剂盒和Trizol手工的方法,但是都出现了问题。

使用试剂盒时,在裂解液加乙醇溶解上柱的过程中出现了裂解液加乙醇分层的现象,感觉出现油状物分层。

使用Trizol提取的时候,将滤膜放在Trizol中裂解,裂解完离心,之后Trizol就分为了两层。现象如图所示~~

初步问了很多人,大家都是是RNA later溶液导致的这种现象
然后RNA就一直提不出来。

不知道大家提RNA的时候有没有遇到这种问题呢?出现之后提取效率会变低么?有没有什么好的解决方法呢?

环境微生物RNA提取
IMG_1219.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lenalee119

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是从环境水体中提取RNA,也是先过滤在滤膜上然后提取。由于RNAlater会影响后续到RNA抽提,所以我有邮件问过TAKARA公司和 life technologies的人,都回复说建议先除去RNAlater后再进行RNA抽提。我最后的处理办法是每张滤膜上RNAlater只加20-50微升,这个量足以不使RNA分解,而又不会影响后续的试剂盒抽提或手工抽提(使用TAKARA公司的RNA试剂盒或和光制药的ISOGEN进行手工抽提都可以有效提取总RNA)。
3楼2015-09-16 13:49:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

chenfeng0823

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
RNA Later中的各种离子浓度很高,建议离心前加一些水再离。
our story begins
2楼2015-07-24 11:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ypan

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用MP公司的试剂盒试一试
4楼2015-09-28 15:00:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ChenYFSCAU

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我采用了qiagen的RNA protector提取革兰氏阴性菌的RNA,后续采用qiagenRNA提取试剂盒,提取到的细菌总RNA有降解,也是提了好多次都有降解,但是,不加protector之后抽提的RNA就没有降解现象了。
后面我就不加这个protector了,快速提取RNA之后赶紧进行反转录成cDNA。
5楼2015-11-22 16:15:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
请填处理意见