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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 绝对荧光定量PCR标准曲线问题
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jhhj2011

新虫 (初入文坛)

[求助] 绝对荧光定量PCR标准曲线问题

我用的仪器是Bio-Rad，第一次做绝对荧光定量PCR，用的染料是SBYR Green，不知道为什么曲线会上升而没有达到平台期，还有每次做的对照也有值，溶解曲线也不好。延伸的温度为60℃，我用的是20ul的体系分别为：
           DNA:2ul
         引物1：2ul
         引物2：2u
SBYR Green :10ul
         ddH2O:4ul  
引物的浓度为200nm，请问各位大神该怎么解决这个问题？

绝对荧光定量PCR标准曲线问题


绝对荧光定量PCR标准曲线问题-1
B0I5[{NF9OOB7S393~%LOOM.png


绝对荧光定量PCR标准曲线问题-2
UFI0[I8IRX(QXG~DIUOVZFW.png
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1楼 2015-06-03 14:13:13
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D东东

银虫 (小有名气)

走进阳光的孩子（被晒黑了）
同求解

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ALLISWELL。
2楼2016-04-24 07:00:05
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D东东

银虫 (小有名气)

走进阳光的孩子（被晒黑了）
请问各个温度的时间，循环数多少哈

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ALLISWELL。
3楼2016-04-24 07:01:05
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夏雨彤110

新虫 (正式写手)
同问，我也遇到同样的问题

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4楼2016-05-08 12:26:12
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