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jhhj2011

新虫 (初入文坛)

[求助] 绝对荧光定量PCR标准曲线问题

我用的仪器是Bio-Rad,第一次做绝对荧光定量PCR,用的染料是SBYR Green,不知道为什么曲线会上升而没有达到平台期,还有每次做的对照也有值,溶解曲线也不好。延伸的温度为60℃,我用的是20ul的体系分别为:
           DNA:2ul
         引物1:2ul
         引物2:2u
SBYR Green :10ul
         ddH2O:4ul  
引物的浓度为200nm,请问各位大神该怎么解决这个问题?

绝对荧光定量PCR标准曲线问题


绝对荧光定量PCR标准曲线问题-1
B0I5[{NF9OOB7S393~%LOOM.png


绝对荧光定量PCR标准曲线问题-2
UFI0[I8IRX(QXG~DIUOVZFW.png
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D东东

银虫 (小有名气)

走进阳光的孩子(被晒黑了)

ALLISWELL。
2楼2016-04-24 07:00:05
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D东东

银虫 (小有名气)

走进阳光的孩子(被晒黑了)

请问各个温度的时间,循环数多少哈

发自小木虫Android客户端
ALLISWELL。
3楼2016-04-24 07:01:05
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夏雨彤110

新虫 (正式写手)

同问,我也遇到同样的问题

发自小木虫Android客户端
4楼2016-05-08 12:26:12
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