| 查看: 1009 | 回复: 3 | |||
qiu3260442金虫 (小有名气)
|
[求助]
pet28诱导产生蛋白是包涵体，要纯化蛋白 已有3人参与
|
| pet28诱导产生蛋白是包涵体，要纯化蛋白，可以不破碎细胞，直接用含有8M尿素的pbs裂解得到目的蛋白吗 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白表达纯化与检测 |
» 猜你喜欢
基金啊基金
已经有3人回复
-
科研孤儿太难了
已经有15人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有10人回复
-
言之凿凿，明天官网会通知放榜？
已经有17人回复
-
时间戳又变了
已经有17人回复
-
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有11人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有23人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有22人回复
-
放榜前的不淡定
已经有12人回复
-
重要消息，中午系统在维护
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问pET28a是干嘛用的？
已经有24人回复
- 蛋白原核表达和包涵体纯化问题
已经有8人回复
- pet28和pet21表达的蛋白对于蛋白结晶的区别
已经有8人回复
- 原来分泌表达的蛋白分泌不出来了。
已经有3人回复
- 跨膜蛋白原核表达、纯化
已经有10人回复
- IPTG诱导表达蛋白
已经有14人回复
- pET28a载体蛋白表达为包涵体
已经有5人回复
- IPTG诱导表达的问题
已经有12人回复
- 蛋白表达不出来是怎么回事？
已经有12人回复
- 包涵体蛋白纯化不溶解，怎麽办？
已经有20人回复
- 蛋白表达诱导剂的选择
已经有3人回复
- 重组蛋白是包涵体怎么溶
已经有42人回复
- 原核表达形成了包涵体怎么办啊？
已经有22人回复
- pet30a原核表达蛋白大小问题
已经有4人回复
- 可溶性蛋白和包涵体
已经有3人回复
- 膜蛋白表达问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】如何提高PET表达系统的蛋白表达量
已经有22人回复
2楼2015-06-03 10:33:05
恶魔的左眼
木虫 (正式写手)
- 应助: 110 (高中生)
- 金币: 2237.7
- 红花: 20
- 帖子: 425
- 在线: 880.6小时
- 虫号: 3705608
- 注册: 2015-03-03
- 专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiu3260442: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-06-19 21:41:29
感谢参与，应助指数 +1
qiu3260442: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-06-19 21:41:29
|
怎么可能。。。不超声破碎，你怎么洗蛋白也出不来啊。。。包涵体不可怕，做个蛋白复性就好了。 包涵体复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
3楼2015-06-03 11:21:41
mataomatao
禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2015-06-03 20:05:25
