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秋天不下雪木虫 (著名写手)
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荧光定量扩增曲线存在的问题已有1人参与
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| 本人是分子生物实验方面的新手,最近在做荧光定量,在做扩增曲线的时候,用10倍稀释来做,总共四个梯度,刚做的时候选择的引物退火温度是60度,发现稀释梯度之间的循环数变化达不到3.3,有时候只变大一个循环,有时候先变大有变小,极其不规律,后来把退火温度提高到 65度,情况也不容乐观,有的引物越稀释ct值越低,有的没变化,连内参的ct值跨度都不是3.3了,变成4以上了,难道是因为存在抑制物?求各位大神帮忙解答一下,不胜感激!!! |
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秋天不下雪
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