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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光定量的起峰好晚是什么问题？为什么我的曲线很难看？
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218854055

银虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量的起峰好晚是什么问题？为什么我的曲线很难看？

这是我做的实时荧光定量标准曲线，准备求扩增效率，但是图不太好看，一号梯度最终产量还没有二号多，还有一些重复不好。求大神解答！

实时荧光定量的起峰好晚是什么问题？为什么我的曲线很难看？
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1楼 2015-05-19 14:50:26
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-05-20 09:04:20
实时荧光定量一般出来的结果做需要关注的两个结果是CT值和溶解曲线。CT值是你最终需要用于计算的值，而溶解曲线是鉴定你的数据可不可用。扩增探针会影响到你的溶解曲线线形。而你说的重复性不好，大多是因为加样的问题。
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2楼2015-05-19 15:59:55
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218854055

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-19 15:59:55
实时荧光定量一般出来的结果做需要关注的两个结果是CT值和溶解曲线。CT值是你最终需要用于计算的值，而溶解曲线是鉴定你的数据可不可用。扩增探针会影响到你的溶解曲线线形。而你说的重复性不好，大多是因为加样的问 ...

溶解曲线没问题，就是重复性可能是操作问题，但是我第一梯度的PCR产量还没第二高是什么回事？
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3楼2015-05-19 18:38:11
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