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218854055

银虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量的起峰好晚是什么问题?为什么我的曲线很难看?

这是我做的实时荧光定量标准曲线,准备求扩增效率,但是图不太好看,一号梯度最终产量还没有二号多,还有一些重复不好。求大神解答!

实时荧光定量的起峰好晚是什么问题?为什么我的曲线很难看?
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-05-20 09:04:20
实时荧光定量一般出来的结果做需要关注的两个结果是CT值和溶解曲线。CT值是你最终需要用于计算的值,而溶解曲线是鉴定你的数据可不可用。扩增探针会影响到你的溶解曲线线形。而你说的重复性不好,大多是因为加样的问题。
2楼2015-05-19 15:59:55
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218854055

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-19 15:59:55
实时荧光定量一般出来的结果做需要关注的两个结果是CT值和溶解曲线。CT值是你最终需要用于计算的值,而溶解曲线是鉴定你的数据可不可用。扩增探针会影响到你的溶解曲线线形。而你说的重复性不好,大多是因为加样的问 ...

溶解曲线没问题,就是重复性可能是操作问题,但是我第一梯度的PCR产量还没第二高是什么回事?
3楼2015-05-19 18:38:11
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