| 查看: 809 | 回复: 3 | |||
lvsecaihong铜虫 (小有名气)
|
[求助]
为什么我的聚丙烯酰胺染色条带总是很暗 已有2人参与
|
|
最近做聚丙烯酰胺凝胶染色后，条带总是很暗，即便是胶颜色也不深。我染色的步骤是这样的： 胶跑好之后，先用水冲洗一遍，然后一版胶用0.1g/100ml的硝酸银染色，摇床摇15-20min，然后冲洗3遍，加1.5g/100ml的NaOH溶液，摇3min，加2/3瓶盖的甲醛再摇7min，冲洗一遍。不知道为什么染的总是很浅，特别是条带。跑胶时加样都已经加到10微升了，跑PCR时，DNA浓度100ng每微升左右，跑琼脂糖凝胶的条带比较亮，但不如Maker的条带亮，PCR体系是上下游引物各1微升，10*buffer2微升，dNTP2微升，模板1微升，rTaq酶0.2微升，水12.8微升。片段300左右，PCR程序95度5min，（94度30s，Tm30s，72度30s，这三步循环35次）72度10min。望大神指导 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有86人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR产品变性聚丙烯酰胺凝胶电泳难题
已经有5人回复
- 为什么SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳跑出来老是一条线，没有条带（mark也跑不出来）
已经有26人回复
- 请教关于PAGE胶跑DNA问题
已经有4人回复
- DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染不显示带
已经有10人回复
- 【急】！考马斯亮蓝的染色问题
已经有11人回复
- SSR PCR 聚丙烯酰胺凝胶电泳条带问题
已经有4人回复
- 高手请进：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中浓缩胶和分离胶的电压不一样？
已经有6人回复
- 跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现
已经有14人回复
- 蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳没有条带
已经有7人回复
- SDS-聚丙烯酰胺电泳在比较高的电压下也跑不动
已经有34人回复
- 为什么我的DNA 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 跑成这个鬼样？
已经有12人回复
- 关于丙烯酰胺凝胶电泳跑DNA样品的几个问题
已经有9人回复
- 我的聚丙烯酰胺胶银染为什么条带是黄色的？
已经有6人回复
- 【求助】蛋白质非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有16人回复
- 请教为什么我的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后条带有些弥散！
已经有9人回复
- 4%PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）250bp处条带出现扭曲，求助！
已经有19人回复
- DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染如何让背景颜色不那么深
已经有23人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶不聚合
已经有7人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳制板的问题
已经有24人回复
2楼2015-05-17 12:49:36
lvsecaihong
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 6.2
- 散金: 12
- 红花: 2
- 帖子: 176
- 在线: 39小时
- 虫号: 2960455
- 注册: 2014-02-09
- 性别: MM
- 专业: 畜牧学
3楼2015-05-17 15:19:42
mataomatao
禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-18 12:54:35
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-18 12:54:35
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2015-05-18 10:56:31
