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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE电泳，浓缩胶无压缩效果，条带弥散
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4225

新虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE电泳，浓缩胶无压缩效果，条带弥散 已有4人参与

最近在跑蛋白电泳，10%分离胶，5%浓缩胶，电压80V，100V，浓缩胶凝固时间充分。
蛋白浓缩电泳过程中溴酚蓝曾弥散状而非一条规则直线，电泳后期（分离胶阶段）溴酚蓝才被压成一条规则直线。
染色后条带有跑偏，关键是Marker条带都出现了弥散，期间有更换新电泳液但是结果一样不理想，求各位帮忙分析一下原因，感激不尽！
小虫没有太多金币，抱歉！

SDS-PAGE电泳，浓缩胶无压缩效果，条带弥散
20150511102000.jpg
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1楼 2015-05-12 16:44:33
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
★
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你跑了几次？ 每次都是这样的吗?
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现在我们能做的就是努力努力再努力
2楼2015-05-13 09:46:24
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4225

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-13 09:46:24
你跑了几次？ 每次都是这样的吗?

跑了4次了，结果每次都这样，marker跑的都不工整，请问大概是什么原因导致的啊？
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3楼2015-05-13 09:54:49
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 4225 at 2015-05-13 09:54:49
跑了4次了，结果每次都这样，marker跑的都不工整，请问大概是什么原因导致的啊？...

如果四次都是这样，就应该是硬件的问题，要么电泳槽有问题，要么你把试剂重新配一下吧再跑吧
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现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-05-13 10:58:24
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4225

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by halfbeer at 2015-05-13 10:58:24
如果四次都是这样，就应该是硬件的问题，要么电泳槽有问题，要么你把试剂重新配一下吧再跑吧...

哦 这个样子啊，那我再试试，谢谢您了！
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5楼2015-05-13 11:37:07
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唐·风

铁杆木虫 (正式写手)
★
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第一，缓冲液有问题没？旧的缓冲液也许会这样。第二，你的丙烯酰胺浓度对吗？

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6楼2015-05-14 09:07:59
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4225

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 唐·风 at 2015-05-14 09:07:59
第一，缓冲液有问题没？旧的缓冲液也许会这样。第二，你的丙烯酰胺浓度对吗？

谢谢您的帮助，电泳条带模糊我们通过更换仪器已经优化了挺多，我会再根据您的建议进行优化，谢谢您了
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7楼2015-09-22 16:23:32
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唐·风

铁杆木虫 (正式写手)
分离胶没问题？

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8楼2015-09-22 16:27:27
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syhzlsd

木虫 (小有名气)
★
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建议把试剂重新配一下，尤其是B、C液的pH要准确
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9楼2015-09-23 13:58:57
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353378132

新虫 (小有名气)
★
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胶没问题的话就是电源电压可能不稳，换个好电源试试

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10楼2017-05-10 13:30:07
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