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w2007wl

银虫 (初入文坛)

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[求助] 一个难溶解，难表达蛋白的分析(RBMX)

RBMX（ RNA binding motif protein, X-linked ） Gene ID: 27316一共两个转录本，我研究的是第一个转录本，一共391个氨基酸。我首先叙述一下这个蛋白的结构和功能，这个是RNA结合蛋白，是hnRNA在加工成熟mRNA工程中的蛋白复合物之一，最近研究表明RBMX参与DNA双链断裂修复过程。用常用的裂解BUFFER裂解293，发现在上清中的RBMX很少，大多数出现在沉淀中（WB)，在293中过表达N端带FLAG标签Flag-RBMX发现表达量很低(WB)，在E.coli中无法表达全长的RBMX蛋白，依据文献进行分段，发现第一段1-131氨基酸无法表达，而后面的两端可以表达。我现在最需要能够在细胞中拿到可溶性的RBMX，该怎么办？

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w2007wl

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