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银虫 (初入文坛)

[求助] 一个难溶解,难表达蛋白的分析(RBMX)

RBMX( RNA binding motif protein, X-linked ) Gene ID: 27316一共两个转录本,我研究的是 第一个转录本,一共391个氨基酸。我首先叙述一下这个 蛋白的结构和功能,这个是RNA结合蛋白,是hnRNA在加工成熟mRNA工程中的蛋白复合物之一,最近研究表明RBMX参与DNA双链断裂修复过程。用常用的裂解BUFFER裂解293,发现在上清中的RBMX很少,大多数出现在沉淀中(WB),在293中过表达N端带FLAG标签Flag-RBMX发现表达量很低(WB),在E.coli中无法表达全长的RBMX蛋白,依据文献进行分段,发现第一段1-131氨基酸无法表达,而后面的两端可以表达。我现在最需要能够在细胞中拿到可溶性的RBMX,该怎么办?
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银虫 (初入文坛)

2楼2015-05-12 10:21:11
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