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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] LC-MS/MS法做药动学 提取回收率问题

LC-MS/MS法做药动学,样品预处理是乙腈沉淀蛋白,内标是用的待测物的氘代内标,关于提取回收率
有这样的疑问:1  沉淀蛋白法的回收率通常都应该是接近100%吗?我的待测物回收率只有88%左右,老师觉得不太对
                         2 我用的氘代内标,理化性质都和我的待测物相近,但现在是内标的提取回收率接近100%(97%左右),待测物却只有88%
可能的原因是什么呢?
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by renzhichu525 at 2015-05-12 12:11:25
那你处理过程中不要加内标,把你的标准品和内标物分别加到血浆里,配成一样的浓度再考察回收率。你内标回收率是这么做的吗?...

搞不懂你的意思
提取回收率简单说就是经提取/ 未提取;经提取的就是加标准品和内标后正常沉淀蛋白处理,未提取就是把标准品和内标加到提取完的空白上清液中,配制成相同浓度。待测物和内标的回收率操作和计算都是同步的。。
8楼2015-05-12 13:46:35
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renzhichu525

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
stingdhk: 金币+1 2015-05-13 19:13:01
需要说一下你的回收率实验操作和计算方法。
2楼2015-05-11 14:45:21
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rosegarden

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
stingdhk: 金币+1 2015-05-13 19:13:12
你们老师是外行吧,这个很正常。
FDA和EMA对生物样品分析的回收率都没有死规定,只要你低中高浓度三个水平的回收率的CV%在15%以内就可以了
坚持
4楼2015-05-11 20:55:49
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by rosegarden at 2015-05-11 20:55:49
你们老师是外行吧,这个很正常。
FDA和EMA对生物样品分析的回收率都没有死规定,只要你低中高浓度三个水平的回收率的CV%在15%以内就可以了

外行倒不至于,你说的规定我都知道,只不过是觉得为什么待测物和它的同位素内标会差这么多?有没有合理的原因解释一下呢
5楼2015-05-12 07:37:21
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