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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ychz

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于LC-MS/MS法测定血浆样品出现类似代谢物峰的问题 已有1人参与

我用LC-MS/MS 法测定药动血浆样品,在药物出峰前,出现了两个新到的峰,且出峰时间稳定,而空白血浆和体外加了标准样品的血浆都没有这两个峰,所以这两个峰的产生一定与代谢有关
然而LC-MS/MS不是先检测母离子再检测碎片粒子么,待测物是平面分子,没有空间异构什么的,所以我猜想
(1)出现这两个峰难道是代谢在质谱检测前某个部位分解成了待测物(比如葡萄糖醛酸酯酯键断裂)
(2)经过代谢基团位置发生变化产生了新的同分异构体
有没有大侠遇到或者看得到过类似问题,非常着急,但请各位指点一二,不胜感激啊~~~~
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张学良老校长

新虫 (小有名气)

这得看你是做的全扫还是子离子吧 最好说清楚了
2楼2014-04-21 22:00:47
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ychz

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张学良老校长 at 2014-04-21 22:00:47
这得看你是做的全扫还是子离子吧 最好说清楚了

我检测的是碎片碎片,在不同的时间检测到了相同的碎片离子峰
3楼2014-04-21 22:35:18
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张学良老校长

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ychz at 2014-04-21 22:35:18
我检测的是碎片碎片,在不同的时间检测到了相同的碎片离子峰...

做个全扫看一下呗 通常来说 确定相同的化合物要一对子离子 不是说一个子离子就能说明问题的 你看看前面两个峰的质谱图,推一下可能的结构试试。 按你的描述 不排除是异构化。至于酯键断裂,我经常做笨样羧酸酯类的化合物,没有这种现象的发生。
4楼2014-04-22 17:16:18
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ychz

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 张学良老校长 at 2014-04-22 17:16:18
做个全扫看一下呗 通常来说 确定相同的化合物要一对子离子 不是说一个子离子就能说明问题的 你看看前面两个峰的质谱图,推一下可能的结构试试。 按你的描述 不排除是异构化。至于酯键断裂,我经常做笨样羧酸酯类的 ...

我做过全扫描,目前确定里面有葡萄糖醛酸酯和硫酸酯,不晓得这两个东西稳定不,我打算再仔细找办法看看有没有异构化
5楼2014-04-22 22:09:46
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melody699

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ychz: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-23 15:22:55
楼主说是测药动血浆样品,那么应该是要定量的,要定量用的应该是MRM模式,那么检测到的峰应该是和原型药物的母离子和子离子相同的成分,即分子量没有变化,从这个角度说应该是原型药物异构化(没有基团结合或脱落,即不是一相或者二相代谢产物);异构化单用LC-MS/MS是推断不出来结构差异的,得借助核磁等其他手段(C谱H谱都做才能准确判断)。
如果楼主做的是全扫描,那么在原型药物之前出现峰多半是代谢产物(因为大部分LC-MS/MS用的都是反相色谱柱,而药物经代谢后极性增加,因此会在原型药物之前出峰),从这两个峰质谱图中可以得到准分子离子峰,从而得到分子量,与原型药物的分子量对比就知道脱掉或者结合上去的基团的分子量,再根据原型药物的结构排除不可能的基团,可以初步确定这两个峰的结构式(基团位点可能无法确定)。
6楼2014-04-23 13:46:38
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ychz

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by melody699 at 2014-04-23 13:46:38
楼主说是测药动血浆样品,那么应该是要定量的,要定量用的应该是MRM模式,那么检测到的峰应该是和原型药物的母离子和子离子相同的成分,即分子量没有变化,从这个角度说应该是原型药物异构化(没有基团结合或脱落, ...

你好,我做的是MRM模式,检测出来了这两个代谢物峰,做全扫描的时候检测出来有葡萄糖醛酸和硫酸酯结合物(当时也没有考虑过异构化的问题)。
本来觉得那两个锋可能是在质朴检测以前酯键断裂了,已经证明样品在流动相条件下是稳定的,出峰位置又很固定,就不晓得是在哪儿断的。
所以现在又在考虑异构化的问题,因为是血浆样品,没有办法把这两个东西单独分离提取出来,没办法做核磁啊,怎么办~~~~~
7楼2014-04-23 15:22:26
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melody699

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ychz at 2014-04-23 15:22:26
你好,我做的是MRM模式,检测出来了这两个代谢物峰,做全扫描的时候检测出来有葡萄糖醛酸和硫酸酯结合物(当时也没有考虑过异构化的问题)。
本来觉得那两个锋可能是在质朴检测以前酯键断裂了,已经证明样品在流动 ...

如果这两个成分真的很重要,而你的原型药物又比较廉价易得,楼主可以给大鼠大量灌胃原药,采集尿样,经过浓缩提取得到纯品,做核磁定结构。这个方法我见别人用过,但是具体的浓缩纯化方法得根据不同的化合物性质决定。这个方法比较麻烦,工作量大,但可行性大。
如果你的实验条件足够好,可以尝试先做TOF定分子式,结合离子肼质谱多级碎片信息,判断是不是异构体。现在还有很多新出的质谱,功能还是很强大的,就是得对质谱足够熟悉,对你的原型药物质谱裂解特征足够了解。
8楼2014-04-24 10:24:14
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