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xiaoqiu2010金虫 (小有名气)
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药代动力学血样处理问题
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我刚刚接触药代动力学，对血样的处理有很多问题，忘高手指点： 1、我的药品在水中不溶，加吐温80和甘油后可澄清，是否可以静脉注射？还有对于吐温与甘油的量有没有要求？ 2、血样处理我选择的乙酸乙酯+甲醇萃取，我的操作步骤是请萃取，离心，取上清，吹干，复溶，HPLC分析 问题是：A：一般萃取几次，萃取一次可以吗？ B：萃取之后取上清是定量取，还是全部取出？如果全部取出，每个样品不能保证萃取率相同怎么办？ C:吹干复溶的体积一般多大，我计划取100uL血浆，300uL萃取剂萃取。我的问题是转移到容量瓶定容是否可行？因为有人建议我转移到容量瓶，但是我觉得，转移过程可能会有损失，并且容量瓶定容是否会稀释倍数太高，检测不到？ 3、看文献有用沉淀蛋白的方法，离心直接进样，这样对柱子的损伤有多大？柱子一般使用寿命会多长？ 希望有人能给与知道，谢谢！ |
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 药代动力学…… |
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1、我的药品在水中不溶，加吐温80和甘油后可澄清，是否可以静脉注射？还有对于吐温与甘油的量有没有要求？ 建议多尝试几个常用溶剂，乙醇，异丙醇，乙醇注射液中浓度不要超过5%，不过这是基于动物福利来讲得。适当可以放宽到10%，再高就影响动物代谢了。 也可以尝试DMSO，注射液中浓度不超过5%。目前欧盟已经禁止在动物实验中使用了，不过国内还没有规定。 2、血样处理我选择的乙酸乙酯+甲醇萃取，我的操作步骤是请萃取，离心，取上清，吹干，复溶，HPLC分析 问题是：A：一般萃取几次，萃取一次可以吗？ 萃取的次数主要看你的方法回收率，一般在80%以上就没有关系。反正你标准曲线同样方法操作，不影响结果。但是萃取前要加入内标。 B：萃取之后取上清是定量取，还是全部取出？如果全部取出，每个样品不能保证萃取率相同怎么办？ 使用内标法就随便取，不会有问题。不过如果不定量取，最后内标会比较难看，建议还是定量取。但是这样在回收率上会有损失。 在样品较稀有的情况下，才使用全部取出的方法。 C:吹干复溶的体积一般多大，我计划取100uL血浆，300uL萃取剂萃取。我的问题是转移到容量瓶定容是否可行？因为有人建议我转移到容量瓶，但是我觉得，转移过程可能会有损失，并且容量瓶定容是否会稀释倍数太高，检测不到？ 300ul这么小的容量瓶？ PK实验一般都是在1.5ml的离心管里配样的。使用普通的移液器来做定量。不明白容量瓶的用意。 3、看文献有用沉淀蛋白的方法，离心直接进样，这样对柱子的损伤有多大？柱子一般使用寿命会多长？ 直接沉淀完全没有问题。CRO公司都是首推直接沉淀，多么经济实惠的方法。UPLC的柱子，那要做好保护，如果是普通的柱子，随便折腾吧，耐用着呢，就是大量进样后记得冲洗保养就好了。 |
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