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标准血浆的处理 已有1人参与
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最近在做药动学，有几个疑问向请教一下大家。 一、在做标准曲线时两种方法哪种对啊？ 我取的是100μL空白血浆，加内标10μL，两倍体积甲醇沉淀蛋白，涡旋（涡旋时间有必要考察吗？）后，12000R/min离心10min，取上清液进样，进样量5μL。 1.直接加10μL不同浓度的对照品溶液在血浆里面配成一系列浓度的标准血浆。这个浓度时按照100μL作为体积来看，还是还应算成110μL或者血浆加成90μL。那么在我后面给药后取血浆的样品中没有加这10μL的对照品，那么是不是应该在血浆中加入10μL甲醇，10μL内标后再两倍体积甲醇沉淀蛋白，来和方法学考察中提取的方法保持一致？ 2.将对照品氮气吹干后加入100μL空白血浆，10μL内标物，两倍体积甲醇沉淀蛋白，涡旋后，12000R/min离心10min，取上清液进样，进样量5μL。 二、从经验上来判断取上清液进样的回收率高还是上清液吹干复溶回收率高？做提取回收率的时候是直接与同浓度对照品溶液峰面积比来算还是空白血浆处理好以后再加同浓度对照品溶液复溶后峰面积比来计算呢？ 三、标准曲线是要取六个来源不同的空白血浆来做平行还是都用一只兔子的空白血浆就行？那么计算标准曲线时是拿六个点的平均数来算吗？ 四、以后的样品测定中每批的随行标准曲线是要每天都重做吗？可以保留之前做的反复进样来做标曲吗？ 问题比较多，拜托大家了~ |
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