应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 提高血浆前处理回收率
121/2返回列表12下一页
查看: 2198  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liu58yeying

金虫 (小有名气)

[求助] 提高血浆前处理回收率

请问一下大家，我在做一个化合物的空白血浆回收率测定实验。现在回收率竟然低到10%左右，但不知道问题出来哪里。化合物有两个酚羟基，应该略显酸性，并且有一个较长的脂肪链，估计极性偏小。我的处理方法如下：1. 加入蛋白沉淀剂。 2. 混匀超声。3. 13000 r/min 离心。4 取上清。5. 旋干并复溶 进样HPLC。

我感觉这个化合物的血浆蛋白结合率会很高吧，是在离心的这一步，化合物都被裹在下面的不溶物里面了。应该怎样提高回收率呢, 是不是要调整一下PH呢（比如加入低浓度的盐酸），或者增加超声时间？

刚刚做代谢，请多指教啊，谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-21 16:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

niuniuabenye

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liu58yeying at 2012-09-21 19:16:22
你好啊，谢谢你的指导。我的师姐做过液液萃取，据她说，因为血浆有200ul左右，加入600 ul 乙酸乙酯，混匀后离心，导致两相中间有一层白白的东西。她的回收率还没有蛋白沉淀高。
那我请教下，看我能不能这样改进下 ...

还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

liu58yeying
4楼2012-09-27 13:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

肉园

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liu58yeying: 金币+5 2012-09-21 19:18:03
小极性的化合物，要不试试液液萃取？通常来说沉淀法适合极性较大的化合物~~
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-21 17:48:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肉园 at 2012-09-21 17:48:49
小极性的化合物，要不试试液液萃取？通常来说沉淀法适合极性较大的化合物~~

你好啊，谢谢你的指导。我的师姐做过液液萃取，据她说，因为血浆有200ul左右，加入600 ul 乙酸乙酯，混匀后离心，导致两相中间有一层白白的东西。她的回收率还没有蛋白沉淀高。
那我请教下，看我能不能这样改进下：
1. 在原血浆中加入酸化的NaCl 水溶液，扩容到600 ul， 然后再加入乙酸乙酯进行萃取。
2. 离心速率应该是多少呢，是不是改变一下离心速率，中间的一层就不会出现啦？

然后再问一下，之前我用蛋白沉淀法，加入沉淀剂后超声，回收率有明显提高，但我看一般的操作都没提到超声啊。

谢谢啊，希望得到你的指导。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-21 19:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by niuniuabenye at 2012-09-27 13:01:04
还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。...

哦，谢谢啊，我一定试试。最近我又发现这个化合物在HPLC上分析的时候前面靠近溶剂峰的位置，峰面积和形态会明显变化，怀疑化合物是不是变质了，毕竟化合物上有两个酚羟基。我干燥复溶是用离心浓缩机干燥的，温度40多度，应该是变质了吧~正确的方法是不是应该用氮吹啊。我们实验室不是做这方面的，所以很多操作不规范，谢谢指教哈
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-28 10:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror822

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2012-10-15 08:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

先试一下你化合物标准品的峰。还有注意下是否旁边有干扰峰，产生离子抑制。
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-20 23:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by niuniuabenye at 2012-09-27 13:01:04
还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。...

试了一下，还是很有改善的，谢谢~
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-21 08:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蔡倩

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，我想问下，看你帖子应该也是小剂量萃取，你们用的什么萃取装置啊，过程损失是怎么算的啊，麻烦了
赞一下 回复此楼
9楼2012-12-03 16:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxdylj_428

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我个人认为，针对你测定的化合物性质，我建议还是采用酸沉淀蛋白结合液液萃取的方式较合理，
赞一下 回复此楼
我将在中药复方成分分析、代谢及应答这个领域一直研究下去
10楼2012-12-04 08:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liu58yeying 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +12 曦熙兮 2026-03-15 12/600 2026-03-19 19:42 by maocaozhuxi
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +17 不知道叫什么！ 2026-03-15 19/950 2026-03-19 15:06 by 尽舜尧1
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 334求调剂 +3 志存高远意在机� 2026-03-16 3/150 2026-03-18 08:34 by lm4875102
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +4 beefly 2026-03-14 4/200 2026-03-17 22:04 by 黄鸟于飞Chao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭