应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 提高血浆前处理回收率
121/2返回列表12下一页
查看: 2242  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liu58yeying

金虫 (小有名气)

[求助] 提高血浆前处理回收率

请问一下大家，我在做一个化合物的空白血浆回收率测定实验。现在回收率竟然低到10%左右，但不知道问题出来哪里。化合物有两个酚羟基，应该略显酸性，并且有一个较长的脂肪链，估计极性偏小。我的处理方法如下：1. 加入蛋白沉淀剂。 2. 混匀超声。3. 13000 r/min 离心。4 取上清。5. 旋干并复溶 进样HPLC。

我感觉这个化合物的血浆蛋白结合率会很高吧，是在离心的这一步，化合物都被裹在下面的不溶物里面了。应该怎样提高回收率呢, 是不是要调整一下PH呢（比如加入低浓度的盐酸），或者增加超声时间？

刚刚做代谢，请多指教啊，谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-21 16:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

niuniuabenye

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liu58yeying at 2012-09-21 19:16:22
你好啊，谢谢你的指导。我的师姐做过液液萃取，据她说，因为血浆有200ul左右，加入600 ul 乙酸乙酯，混匀后离心，导致两相中间有一层白白的东西。她的回收率还没有蛋白沉淀高。
那我请教下，看我能不能这样改进下 ...

还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

liu58yeying
4楼2012-09-27 13:01:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

肉园

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liu58yeying: 金币+5 2012-09-21 19:18:03
小极性的化合物，要不试试液液萃取？通常来说沉淀法适合极性较大的化合物~~
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-21 17:48:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肉园 at 2012-09-21 17:48:49
小极性的化合物，要不试试液液萃取？通常来说沉淀法适合极性较大的化合物~~

你好啊，谢谢你的指导。我的师姐做过液液萃取，据她说，因为血浆有200ul左右，加入600 ul 乙酸乙酯，混匀后离心，导致两相中间有一层白白的东西。她的回收率还没有蛋白沉淀高。
那我请教下，看我能不能这样改进下：
1. 在原血浆中加入酸化的NaCl 水溶液，扩容到600 ul， 然后再加入乙酸乙酯进行萃取。
2. 离心速率应该是多少呢，是不是改变一下离心速率，中间的一层就不会出现啦？

然后再问一下，之前我用蛋白沉淀法，加入沉淀剂后超声，回收率有明显提高，但我看一般的操作都没提到超声啊。

谢谢啊，希望得到你的指导。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-21 19:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by niuniuabenye at 2012-09-27 13:01:04
还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。...

哦，谢谢啊，我一定试试。最近我又发现这个化合物在HPLC上分析的时候前面靠近溶剂峰的位置，峰面积和形态会明显变化，怀疑化合物是不是变质了，毕竟化合物上有两个酚羟基。我干燥复溶是用离心浓缩机干燥的，温度40多度，应该是变质了吧~正确的方法是不是应该用氮吹啊。我们实验室不是做这方面的，所以很多操作不规范，谢谢指教哈
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-28 10:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirror822

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2012-10-15 08:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

先试一下你化合物标准品的峰。还有注意下是否旁边有干扰峰，产生离子抑制。
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-20 23:15:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu58yeying

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by niuniuabenye at 2012-09-27 13:01:04
还是建议试一下液液萃取，将血浆酸化，加10%的甲酸10~20ul。因为你的化合物是酸性的，调整水相PH低于化合物2~3个PH，理论上是可以提高回收率的。...

试了一下，还是很有改善的，谢谢~
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-21 08:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蔡倩

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主，我想问下，看你帖子应该也是小剂量萃取，你们用的什么萃取装置啊，过程损失是怎么算的啊，麻烦了
赞一下 回复此楼
9楼2012-12-03 16:07:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxdylj_428

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我个人认为，针对你测定的化合物性质，我建议还是采用酸沉淀蛋白结合液液萃取的方式较合理，
赞一下 回复此楼
我将在中药复方成分分析、代谢及应答这个领域一直研究下去
10楼2012-12-04 08:42:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liu58yeying 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +16 2261744733 2026-04-08 16/800 2026-04-09 07:58 by Sammy2
[考研] 化学调剂求助 +13 LULONG1 2026-04-03 18/900 2026-04-08 21:54 by LULONG1
[考研] 求材料调剂，一志愿郑州大学289分 +21 硕星赴 2026-04-03 21/1050 2026-04-08 11:55 by 猪会飞
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-06 3/150 2026-04-07 11:15 by hugr
[考研] 一志愿北京交通大学材料工程总分358求调剂 +4 cs0106 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:46 by imissbao
[考研] 工科08专硕机械275求调剂 +3 AaAa7420 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:26 by jp9609
[考研] 考研调剂 +11 小sun要好运 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:02 by qlm5820
[考研] 277求调剂 +4 12A3 2026-04-02 5/250 2026-04-04 20:28 by 蓝云思雨
[考研] 321求调剂 +6 认真求上学 2026-04-03 6/300 2026-04-04 19:51 by dongzh2009
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:46 by 欣喜777
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
[考研] 求调剂 +3 心想事成可 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:22 by wangjy2002
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭