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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by liu58yeying at 2012-09-21 19:16:22
你好啊,谢谢你的指导。我的师姐做过液液萃取,据她说,因为血浆有200ul左右,加入600 ul 乙酸乙酯,混匀后离心,导致两相中间有一层白白的东西。她的回收率还没有蛋白沉淀高。
那我请教下,看我能不能这样改进下 ...

不一定非要用乙酸乙酯  可以试试正己烷-二氯甲烷-异丙醇(2:1:0.1)
而且可以加大萃取剂用量  比如200ul血浆加入3ml  涡旋混匀3min后  离心上清吹干 然后用流动相200ul复溶
萃取剂的种类和比例需要摸索
你目前的实验方法 一方面可能是回收低  还有可能是样品在实验条件下不稳定
试试不加血浆  用现在的处理方法处理  看看是不是样品会降解  排除一下 good luck
11楼2012-12-04 08:55:24
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wangyuanji

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by xxdylj_428 at 2012-12-04 08:42:43
我个人认为,针对你测定的化合物性质,我建议还是采用酸沉淀蛋白结合液液萃取的方式较合理,

如果用两步,即先液液萃取,再沉淀蛋白,合并这两步操作的提取液,挥干、复溶,来实现血浆中极性大小差异较大的几种成分的同时提取、分析,是否可行?
心态比能力重要
12楼2012-12-05 16:15:14
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