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liu58yeying

金虫 (小有名气)

[求助] 提高血浆前处理回收率

请问一下大家,我在做一个化合物的空白血浆回收率测定实验。现在回收率竟然低到10%左右,但不知道问题出来哪里。化合物有两个酚羟基,应该略显酸性,并且有一个较长的脂肪链,估计极性偏小。我的处理方法如下:1. 加入蛋白沉淀剂。 2. 混匀超声。3. 13000 r/min 离心。4 取上清。5. 旋干并复溶 进样HPLC。

我感觉这个化合物的血浆蛋白结合率会很高吧,是在离心的这一步,化合物都被裹在下面的不溶物里面了。应该怎样提高回收率呢, 是不是要调整一下PH呢(比如加入低浓度的盐酸),或者增加超声时间?

刚刚做代谢,请多指教啊,谢谢。
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

先试一下你化合物标准品的峰。还有注意下是否旁边有干扰峰,产生离子抑制。
7楼2012-10-20 23:15:19
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