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Amily1002

木虫 (小有名气)

[求助] 关于标准曲线设定,急求意见!

正在做的药,需要做尾静脉注射,大概浓度范围是5到50000ng,标准曲线范围该如何确定?
有人建议不能做这么宽的范围,但是又不知道再怎么往下做了
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流~~~ 2012-03-23 16:31:56
线性跨度太大,建议两条标曲,低浓度和高浓度范围各一条标曲,准确性会好些
梦想、激情、灵感、体验--che
3楼2012-03-23 14:55:19
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xxaijwd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+2, 3Q 2012-03-23 21:12:54
你要是做两条标曲差不多就是两套方法学了。血浆稀释准确度的话你可以这样做,比较浪费血浆的做法是:(假如你原来方法是1mL血浆,加50微升QC样品)配制QC高标准溶液以及2倍QC高浓度的标准溶液,取1mL血浆,加50微升QC高标准溶液或者2倍QC高标准溶液,混匀后取出525微升,加入0.5mL空白血浆,补加25微升溶解标准溶液的溶剂,其它按照你血浆样品处理方法处理,这样你的两个浓度都被稀释了2倍,也就都在你的曲线范围内了,但是这样也只是把你的标曲扩大到2倍QC高的浓度。不浪费的做法就是1mL血浆加25微升标准溶液,补加25微升甲醇,其它同法处理了。实际生物样本做的时候就取一半的血浆,补加一半空白血浆,其它同你血浆样品处理方法了。

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8楼2012-03-23 17:38:39
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普通回帖

wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流~~~ 2012-03-23 16:31:49
这么宽的范围,线性不一定好做。但要是这些检测浓度是你检测中必须要用到的话,那就得做这么大。
1234
2楼2012-03-23 14:39:40
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流~~~ 2012-03-23 16:32:02
看楼主样品浓度跨度1w倍,很难只用1条标曲完成,需将低浓度做一条,相对较高浓度再做一条。低浓度可以加权:1/c或1/c/c。
4楼2012-03-23 15:12:20
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白水6177

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+2, 说的很详细~~~ 2012-03-23 16:31:38
把握一个原则,串级质谱可以改成单级质谱模式用,测定的浓度可以高些,一般串级质谱进样量最好不过微克级别,单级的模式可以扩大十倍。
另外做个血浆样品的稀释准确度,对于个别较高的点可以稀释测定。看你的范围这么宽泛,知道药物在体内消除应该很快,指导原则要求不一定非要药代动力学考察到那么低的浓度,倒是可以做到Cmax的 1/10~1/20,反映的一些参数就已经比较有意义了。
关于做两条标线的情况,也可以,但是结合实验室情况,不要给串级质谱强行进大浓度的,另外设计的两条标准曲线之间必须有交叉点,例如5~1000,500~50000,考察质控点的时候设计一个800,上下都能用,考察两个标线。
5楼2012-03-23 16:23:42
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Amily1002

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 白水6177 at 2012-03-23 16:23:42:
把握一个原则,串级质谱可以改成单级质谱模式用,测定的浓度可以高些,一般串级质谱进样量最好不过微克级别,单级的模式可以扩大十倍。
另外做个血浆样品的稀释准确度,对于个别较高的点可以稀释测定。看你的范围 ...

血浆样品的稀释准确度应该怎么做啊
那么我可以最低设到10ng就行么,做个10到5000左右的,再把高于5000的血浆稀释就行么
6楼2012-03-23 17:03:00
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Amily1002

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by guevara1967 at 2012-03-23 14:55:19:
线性跨度太大,建议两条标曲,低浓度和高浓度范围各一条标曲,准确性会好些

是不是就要做两套方法学了?
7楼2012-03-23 17:14:22
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zengwenqin

银虫 (正式写手)


xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-03-26 19:34:38
我们曾经做过这么宽的范围,不过这需要看你的质谱能不能进这么大浓度的,50000ng浓度太大了吧,我们实验室的质谱最大也就能进5000ng的吧,浓度太大经常会雾化不好的,导致高点上不去,就是高浓度点跟低浓度点不成线性了,你浓度大的点可以考虑稀释后再测的,跟着做稀释QC就行了
9楼2012-03-26 18:33:22
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Amily1002

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by xxaijwd at 2012-03-23 17:38:39:
你要是做两条标曲差不多就是两套方法学了。血浆稀释准确度的话你可以这样做,比较浪费血浆的做法是:(假如你原来方法是1mL血浆,加50微升QC样品)配制QC高标准溶液以及2倍QC高浓度的标准溶液,取1mL血浆,加50微 ...

谢谢
10楼2012-03-26 19:32:34
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