| 查看: 1027 | 回复: 2 | ||
xingyun789金虫 (小有名气)
|
[求助]
有关Western Blot 结果方面的求助 已有2人参与
|
以下是我最近做的WB结果，其中，红方框内是我的目的条带，下面的那条带是非特异带，箭头所指处有一些背景，我封闭的时间是1.5个小时，用的是5%脱脂奶粉，一抗1:500 （鼠源多抗，效价不是很高），4℃孵育过夜，然后TBST洗脱3次，每次10min，二抗1:1000常温孵育2小时，然后TBST洗脱3次，每次10分钟，完毕后用ECL发光法进行曝光，黑暗下发光很弱，因此曝光时间约2min，请问，出现这样的情况该如何进行改进，谢谢！ 360截图20150427091728531.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助western显影问题
已经有3人回复
- 有关western blot 的问题
已经有14人回复
- 求助western blot灰度分析的单位
已经有6人回复
- western blot出现多条带是什么原因
已经有8人回复
- western-blot的问题！！！
已经有5人回复
- 真情求助：买的用于Western blot 的一抗能不能用来做免疫荧光或者免疫组化
已经有6人回复
- 求做western-blot所需要的所有试剂及仪器
已经有3人回复
- Western blot结果分析
已经有5人回复
- western blot没有结果是怎么回事~~
已经有12人回复
- 关于western blot样品制备
已经有8人回复
- western blot 出不来结果！！！
已经有17人回复
- Western Blot出现问题
已经有19人回复
- 关于western blot的小问题
已经有12人回复
- western blot中蛋白质转印问题
已经有17人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- 关于Western blot的抗体孵育阶段
已经有7人回复
- Western blot中出现的问题-求高手指点
已经有17人回复
- 【求助/交流】westernblot
已经有10人回复
- 【求助/交流】请教关于western blot转印方法的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
已经有19人回复
- 【求助/交流】westernblot的背景怎么消除呀
已经有10人回复
- 【求助/交流】western blot 的一抗二抗由来？
已经有4人回复
- 原创首发：Tips for Western Blot-一些小技巧而已
已经有13人回复
2楼2015-04-27 14:59:29
18761615793
木虫 (正式写手)
小虫
- MolEPI: 1
- 应助: 172 (高中生)
- 金币: 646.4
- 散金: 170
- 红花: 16
- 帖子: 863
- 在线: 144.9小时
- 虫号: 3603131
- 注册: 2014-12-19
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-28 09:24:30
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-28 09:24:30
|
一抗二抗封闭一小时即可（封闭的时候在震床上轻轻摇晃或轻微震荡），每次用PBS洗的时候也要轻轻晃动，牛奶封闭的时间一小时左右，还有加入抗体4度过夜，可以改为室温震荡封闭1小时，你的整体用时都偏长，可以减少时间，过程中注意每一步的洗涤，虽然有背景，但是不算严重 这是有关WB问题，总结的挺好，可以看看http://www.detaibio.com/material-western-blot-faq.html |
3楼2015-04-27 15:17:48
20