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sunwaitingYW

银虫 (小有名气)

[求助] 求助western显影问题 已有2人参与

刚开始做western，我用的二抗是辣根过氧化物酶标记的二抗，然后我显色买的是DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒，但是加完显色液之后放到仪器暗室里就什么都看不到，但是膜拿出来可以看到上面有很多有颜色的条带（跟marker似的），请问我是不是选错了显色方法啊？
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做一只快乐的小铜虫，专心科研，面朝大海，春暖花开~~~~
1楼 2015-04-01 09:18:53
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xiaoqi5992

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunwaitingYW: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-04-02 08:52:21
如果膜上有条带，说明肯定有荧光，应该是荧光淬灭太快了，你把上样量调低试试呢
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2楼2015-04-01 11:01:41
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunwaitingYW: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-02 08:48:45
膜上拿出来有条带说明是曝光过度了，仪器暗室没有荧光可能是由于仪器本身曝光的原因所导致的，你调试一下仪器，另外，可以直接在暗室用胶片来曝光，谢谢
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3楼2015-04-01 21:57:19
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percoll

新虫 (小有名气)
选错试剂了，应该用ECL发光液显色，DAB是直接在膜上看的，不会有荧光。

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2015-04-04 08:29:56
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