24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1937  |  回复: 7

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于图位克隆的一点疑惑

大家好:我最近看了些图位克隆的资料,我有一个问题,那就是对于已经测序的物种,在已有标记无法进一步缩小距离的情况下,如何设计新的标记,,如CAPS和Indel标记,如何利用数据库中的数据设计?我要克隆的序列不是未知的吗?那如何设计引物啊?求大侠讲解下吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yingheqian

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lwk5716: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢你的回答! 2015-04-26 15:18:20
lwk5716: 金币+12, ★★★很有帮助 2015-04-28 11:49:59
你用的两个亲本如果都有测序的数据了,可以比对定位的区域中的序列差异来设计Indel或CAPS差异。如果没有,那么只能根据参考品种的序列设计STS引物扩增后电泳,看你运气,有的物种InDel比例高,有的低。也可以把2个品种的PCR产物直接测序,看看有没有设计内切酶位点的SNP,有的话,就是一个CAPS标记。做SNP把握更大一些。
2楼2015-04-26 12:54:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yingheqian at 2015-04-26 12:54:32
你用的两个亲本如果都有测序的数据了,可以比对定位的区域中的序列差异来设计Indel或CAPS差异。如果没有,那么只能根据参考品种的序列设计STS引物扩增后电泳,看你运气,有的物种InDel比例高,有的低。也可以把2个品 ...

我将来可能会做玉米的图位克隆,但是是地方品种,不是测序的那个品种,看来只能参考测序的品种序列了。
3楼2015-04-26 15:20:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yingheqian at 2015-04-26 12:54:32
你用的两个亲本如果都有测序的数据了,可以比对定位的区域中的序列差异来设计Indel或CAPS差异。如果没有,那么只能根据参考品种的序列设计STS引物扩增后电泳,看你运气,有的物种InDel比例高,有的低。也可以把2个品 ...

我还有一个问题想请教一下,用2个品种的PCR产物去测序,那么已有标记之间要是间隔的碱基数比较多的话,PCR要设计多长的片段合适?
4楼2015-04-27 20:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yingheqian

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lwk5716 at 2015-04-27 20:49:53
我还有一个问题想请教一下,用2个品种的PCR产物去测序,那么已有标记之间要是间隔的碱基数比较多的话,PCR要设计多长的片段合适?...

这个靠运气,也看物种,我们蚕里面检测出PCR长度多态的STS标记比例只有10%左右。测序出来的SNP有50%左右。我们一般设计引物可以扩展800bp左右的PCR产物,刚好一个测序反应基本可以测通。
5楼2015-04-27 21:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yingheqian at 2015-04-27 21:27:48
这个靠运气,也看物种,我们蚕里面检测出PCR长度多态的STS标记比例只有10%左右。测序出来的SNP有50%左右。我们一般设计引物可以扩展800bp左右的PCR产物,刚好一个测序反应基本可以测通。...

谢谢你!
6楼2015-04-28 13:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

88mc

木虫 (小有名气)

我们也是做玉米的,之前也是利用参考序列,但是难找到能用的标记,后来好像是川农对17个玉米自交系进行重测序,并且设计了很多SSR标记,你可以寻找跟你材料血缘比较近的材料进行参考,自己设计引物或者利用他们现成的筛一下,有多态性的标记还是很多的。那个你可以吧你的邮箱发给我,我把那个序列分析表发给你,小木虫我不会上传文件
7楼2015-07-26 10:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 88mc at 2015-07-26 10:10:27
我们也是做玉米的,之前也是利用参考序列,但是难找到能用的标记,后来好像是川农对17个玉米自交系进行重测序,并且设计了很多SSR标记,你可以寻找跟你材料血缘比较近的材料进行参考,自己设计引物或者利用他们现成 ...

太谢谢你了,我的邮箱是lwk5716@163.com
8楼2015-07-27 21:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lwk5716 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +12 hanamiko 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:34 by 运气yunqi
[考研] 建环,能源,土木老师路过看一看!!! +4 嘿嘿uu 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:42 by 无懈可击111
[考研] 求调剂0703 +5 周嘉尧 2026-03-31 8/400 2026-04-01 20:32 by ltltkkk
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +11 hyz0119 2026-03-31 12/600 2026-04-01 18:40 by 伟大河北
[考研] 一志愿厦门大学化学工程(专硕)-数二英二406分-求调剂 +4 厦大化工 2026-04-01 4/200 2026-04-01 17:54 by JYD2011
[考研] 362求调剂 +13 西南交材料专硕3 2026-03-31 13/650 2026-04-01 17:38 by JYD2011
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +10 脚滑的守法公民 2026-03-27 10/500 2026-04-01 17:23 by pies112
[考研] 314求调剂 +4 溪云珂 2026-03-26 4/200 2026-04-01 17:00 by oooqiao
[考研] 0856,材料与化工321分求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 14/700 2026-04-01 15:58 by yanflower7133
[考研] 086000生物与医药 初试274求调剂 +5 小叮当来了 2026-03-30 6/300 2026-04-01 14:25 by mxj1203
[考研] 324求调剂 +4 想上学求调 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:19 by ZXlzxl0425
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 322求调剂 +4 熹僖XX 2026-03-31 4/200 2026-04-01 08:21 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +5 Ripcord上岸 2026-03-27 5/250 2026-03-31 19:52 by mg1014
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:35 by hypershenger
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
信息提示
请填处理意见