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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆基因有突变
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)

[求助] 克隆基因有突变

是这样的，最近刚克隆了一些基因，有几个有一个碱基的突变，突变位置是在编码框中，是三联子密码的第三位，没有引起氨基酸的变化，我接下来想做原核表达和表达蛋白提取，请问这种情况会对我实验有影响吗？

如果有影响是不是得做下点突变，怎么操作呢？

因为这个基因比较难扩，高保真酶扩不出来的，所以一有突变我就着急呀，各位高手帮我一下吧。
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1楼 2012-11-29 09:53:13
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polepolar

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果氨基酸没有改变的话,是不影响蛋白表达的.
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云淡风轻a
北京普尔普乐生物技术有限公司(www.polepolar.com)
2楼2012-11-29 11:03:27
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有影响氨基酸的话，就不用做点突变了，除非你特别的闲，呵呵
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云淡风轻a
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2012-11-29 11:12:34
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小黑快跑

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不影响表达干嘛要做点突变，想点突变做overlap pcr 吧
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云淡风轻a
4楼2012-11-29 13:12:19
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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云淡风轻a: 金币+3 2013-03-27 18:25:09
不需要做点突变的，氨基酸不变就没什么问题，我就比较倒霉，突变三个碱基，个个都是三联密码子第一位，结果可想而知
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云淡风轻a
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
5楼2012-11-29 15:03:08
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by Marado at 2012-11-29 15:03:08
不需要做点突变的，氨基酸不变就没什么问题，我就比较倒霉，突变三个碱基，个个都是三联密码子第一位，结果可想而知

扩不出来就是麻烦，要是扩扩简单我就做重复，谢谢你的回答。
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6楼2012-11-29 15:47:45
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
2楼: Originally posted by polepolar at 2012-11-29 11:03:27
如果氨基酸没有改变的话,是不影响蛋白表达的.

好的，谢谢
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7楼2012-11-29 15:48:05
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-29 11:12:34
没有影响氨基酸的话，就不用做点突变了，除非你特别的闲，呵呵

真的一点不闲，时间很紧的
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8楼2012-11-29 15:48:28
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云淡风轻a

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
4楼: Originally posted by 小黑快跑 at 2012-11-29 13:12:19
不影响表达干嘛要做点突变，想点突变做overlap pcr 吧

还是听各位的不做了
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9楼2012-11-29 15:48:50
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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云淡风轻a: 金币+2 2013-03-27 18:24:58
如果不是变成表达宿主的稀有密码子的话应该不影响表达，直接用就行了。楼主很lucky啊。
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10楼2012-11-30 07:21:27
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