24小时热门版块排行榜    

查看: 3259  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

[求助] 如何去除引物二聚体 已有5人参与

做荧光定量PCR,在主峰前边出现一小峰,如何消除这个小峰?这个小峰不是很大,如果没有这个小峰,我的图就很完美了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
6楼: Originally posted by liubolin945 at 2015-04-26 08:49:45
我用的 是 RR420A
普通PCR  电泳看不到二聚体,但是定量上就能看到这个小峰。

你是怎么消除的?
7楼2015-04-26 13:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飞走的希望: 金币+2 2015-04-24 09:18:35
使用特异性高的Taq酶扩增,图会非常清晰,但得保证你反应体系中其他东西的质量,热启动酶可以尝试
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-04-24 08:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-24 08:59:22
使用特异性高的Taq酶扩增,图会非常清晰,但得保证你反应体系中其他东西的质量,热启动酶可以尝试...

你是说需要换酶吗?塔克拉公司的酶呢?我用的这个,我在想先提高退火温度,在做一下。有人说提高退火温度可以降低引物二聚体的影响。
3楼2015-04-24 09:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飞走的希望: 金币+2 2015-04-25 07:18:09
建议提高退火温度试一下,这是一个消除引物二聚体的办法,还有就是降低引物用量,如果引物二聚体比较弱的话对对定量结果影响不大,数据可以用。你说的峰是熔解曲线么??可能是带入污染了,建议重做一次,如果还是这样可能得重新设计引物
4楼2015-04-24 10:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-11 16:57 by Ai19911123
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +7 Tide man 2026-08-10 8/400 2026-08-11 15:49 by 铁帽子农民
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见