24小时热门版块排行榜    

查看: 3262  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

[求助] 如何去除引物二聚体 已有5人参与

做荧光定量PCR,在主峰前边出现一小峰,如何消除这个小峰?这个小峰不是很大,如果没有这个小峰,我的图就很完美了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

WHABnew

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飞走的希望: 金币+2 2015-04-25 07:18:09
建议提高退火温度试一下,这是一个消除引物二聚体的办法,还有就是降低引物用量,如果引物二聚体比较弱的话对对定量结果影响不大,数据可以用。你说的峰是熔解曲线么??可能是带入污染了,建议重做一次,如果还是这样可能得重新设计引物
4楼2015-04-24 10:27:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飞走的希望: 金币+2 2015-04-24 09:18:35
使用特异性高的Taq酶扩增,图会非常清晰,但得保证你反应体系中其他东西的质量,热启动酶可以尝试
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-04-24 08:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞走的希望

木虫 (著名写手)

笑的太痴颠

引用回帖:
2楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-24 08:59:22
使用特异性高的Taq酶扩增,图会非常清晰,但得保证你反应体系中其他东西的质量,热启动酶可以尝试...

你是说需要换酶吗?塔克拉公司的酶呢?我用的这个,我在想先提高退火温度,在做一下。有人说提高退火温度可以降低引物二聚体的影响。
3楼2015-04-24 09:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
飞走的希望: 金币+2 2015-04-25 07:18:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞走的希望 at 2015-04-24 09:20:02
你是说需要换酶吗?塔克拉公司的酶呢?我用的这个,我在想先提高退火温度,在做一下。有人说提高退火温度可以降低引物二聚体的影响。...

恩恩,是可以的,从退火温度入手看看,takara的酶也是不错的,但是还是建议热启动型的酶,扩增没有非特异性产物
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
5楼2015-04-24 13:19:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 9/450 2026-08-11 22:12 by 医学老男孩
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 F4zcb7xRCEJA 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:51 by pMlf9MbdMHyc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 4/200 2026-08-11 21:15 by thgx1vqMqrLw
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-10 7/350 2026-08-11 20:39 by thgx1vqMqrLw
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GpvwGNVshCOp 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:39 by thgx1vqMqrLw
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
请填处理意见