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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助做过CHO质粒载体构建或改造的大神！载体序列未知，要如何对载体进行合理改造？
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rola234

新虫 (小有名气)

[求助] 求助做过CHO质粒载体构建或改造的大神！载体序列未知，要如何对载体进行合理改造？

老板给了我两个实验室常用的CHO表达载体，都是穿梭载体，但受制于公司专利，我们只有这两个质粒载体的结构图，并没有全长DNA碱基序列，就连多克隆位点的那段不长的DNA序列也没有，师兄师姐们用这两个载体时也就是酶切酶连一下，然后用上面的NeoR基因筛选一下阳性克隆，也没有去关注过要怎样去进行改造和优化。老板的意思是对这两个现有的质粒载体进行改造，使之成为我们实验室自主知识产权的表达载体，并且要能顺利表达我们实验室自制的抗体蛋白，请问有这方面经验的大神吗？如果没有载体的全长DNA碱基序列，单靠多克隆位点上的那几个酶切位点要怎么对载体进行改造啊？能提供一些思路也好啊！谢谢大家！
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我可以走得很慢，但我不会后退！
1楼 2015-04-16 09:15:09
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