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rola234新虫 (小有名气)
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[求助]
求助做过CHO质粒载体构建或改造的大神!载体序列未知,要如何对载体进行合理改造?
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| 老板给了我两个实验室常用的CHO表达载体,都是穿梭载体,但受制于公司专利,我们只有这两个质粒载体的结构图,并没有全长DNA碱基序列,就连多克隆位点的那段不长的DNA序列也没有,师兄师姐们用这两个载体时也就是酶切酶连一下,然后用上面的NeoR基因筛选一下阳性克隆,也没有去关注过要怎样去进行改造和优化。老板的意思是对这两个现有的质粒载体进行改造,使之成为我们实验室自主知识产权的表达载体,并且要能顺利表达我们实验室自制的抗体蛋白,请问有这方面经验的大神吗?如果没有载体的全长DNA碱基序列,单靠多克隆位点上的那几个酶切位点要怎么对载体进行改造啊?能提供一些思路也好啊!谢谢大家! |
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