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[求助]
求助： 使用western blot 法测定特定组织中酶蛋白的表达 已有1人参与
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如题， 本虫为非药理学专业， 现想要测定一个提取物连续给药对大鼠组织中酶蛋白表达的影响。 因为从前没有做过，本实验室内也没有经验，特此发帖求助。 大概学习了一下，应该需要在电泳蛋白质分离后使用一抗、二抗标记，染色后分析条带灰度。 但是不明白几个事情： 1.需要准备哪一种试剂盒，怎样选择试剂盒？ 2.在哪几步中会用到试剂盒？ 3.组织在取样后应该怎样冷冻？必须用液氮冷冻吗？ 总之，将实验看下来一遍，还有很多不清楚，至少先弄明白试剂盒的选购和组织样品的收集吧！ 麻烦大家了，谢谢^^！ |
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回复第三问：组织取样应该在冰上操作，剪取适合大小的组织后用锡箔纸包起来，然后迅速丢入液氮或-80度的冰箱中。如果没有液氮，也可以暂时取好组织后放在冰箱-20度保存一会，最后一起放入-80的冰箱。 顺便把我们实验室的Western Blot的操作流程发给你。 |
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