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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助】菜鸟自学 western blot 关于一抗 ，二抗
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汤圆

铜虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】菜鸟自学 western blot 关于一抗 ，二抗

v自学western blot ，什么基础都没，想用actin 练一下，请问需要蛋白定量么？ 关于一抗、二抗该怎么选呢
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1楼 2011-08-18 11:50:53
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tony0628

木虫 (小有名气)

阿郎哥

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-08-18 18:04:13
具体问题具体分析。蛋白定量是针对以检测变化趋势为目的的WB。关于抗体的选择，一抗最严谨，针对被检测抗体的来源，要具体到确切的被检测蛋白是什么蛋白，一抗不能与被检测蛋白同源。二抗选择范围则比较宽泛，仅针对一抗的来源即可。
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法是万年宝，人是百年囊。人去法犹在，代代护朝纲！
2楼2011-08-18 16:50:01
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汤圆

铜虫 (初入文坛)
练手，细胞不是都表达actin 么？如果操作正确，就该有条带对吧，想看看看表达actin 的情况，以确定自己的操作，一抗应该怎么选吖？
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3楼2011-08-18 18:43:09
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汤圆

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tony0628 at 2011-08-18 16:50:01:
具体问题具体分析。蛋白定量是针对以检测变化趋势为目的的WB。关于抗体的选择，一抗最严谨，针对被检测抗体的来源，要具体到确切的被检测蛋白是什么蛋白，一抗不能与被检测蛋白同源。二抗选择范围则比较宽泛，仅针 ...

练手，细胞不是都表达actin 么？如果操作正确，就该有条带对吧，想看看看表达actin 的情况，以确定自己的操作，一抗应该怎么选吖？
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4楼2011-08-18 18:43:40
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tony0628

木虫 (小有名气)

阿郎哥

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-08-19 10:41:59
汤圆(金币+2): 谢谢，那么我们每次看细胞表达不同的蛋白是不是要买不同的一抗呢？ 2011-08-19 15:13:25
比如说，你的蛋白样品来源于人的细胞，那么一抗你就选择能够针对人源的抗beta-actin的一抗，试剂公司都有卖的！且试剂公司网站上都有详细的说明书。网上多找找吧！
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法是万年宝，人是百年囊。人去法犹在，代代护朝纲！
5楼2011-08-19 00:01:35
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
可以试一下显影的仪器
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一直向前！
6楼2013-12-02 13:33:39
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