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汤圆

铜虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】菜鸟自学 western blot 关于一抗 ,二抗

v自学western blot ,什么基础都没,想用actin 练一下,请问需要蛋白定量么? 关于一抗、二抗该怎么选呢
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汤圆

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tony0628 at 2011-08-18 16:50:01:
具体问题具体分析。蛋白定量是针对以检测变化趋势为目的的WB。关于抗体的选择,一抗最严谨,针对被检测抗体的来源,要具体到确切的被检测蛋白是什么蛋白,一抗不能与被检测蛋白同源。二抗选择范围则比较宽泛,仅针 ...

练手,细胞不是都表达actin 么?如果操作正确,就该有条带对吧,想看看看表达actin 的情况,以确定自己的操作,一抗应该怎么选吖?
4楼2011-08-18 18:43:40
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tony0628

木虫 (小有名气)

阿郎哥

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-08-18 18:04:13
具体问题具体分析。蛋白定量是针对以检测变化趋势为目的的WB。关于抗体的选择,一抗最严谨,针对被检测抗体的来源,要具体到确切的被检测蛋白是什么蛋白,一抗不能与被检测蛋白同源。二抗选择范围则比较宽泛,仅针对一抗的来源即可。
法是万年宝,人是百年囊。人去法犹在,代代护朝纲!
2楼2011-08-18 16:50:01
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汤圆

铜虫 (初入文坛)

练手,细胞不是都表达actin 么?如果操作正确,就该有条带对吧,想看看看表达actin 的情况,以确定自己的操作,一抗应该怎么选吖?
3楼2011-08-18 18:43:09
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tony0628

木虫 (小有名气)

阿郎哥

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-08-19 10:41:59
汤圆(金币+2): 谢谢,那么我们每次看细胞表达不同的蛋白是不是要买不同的一抗呢? 2011-08-19 15:13:25
比如说,你的蛋白样品来源于人的细胞,那么一抗你就选择能够针对人源的抗beta-actin的一抗,试剂公司都有卖的!且试剂公司网站上都有详细的说明书。网上多找找吧!
法是万年宝,人是百年囊。人去法犹在,代代护朝纲!
5楼2011-08-19 00:01:35
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