| 查看: 3086 | 回复: 9 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
[求助]
免疫组化，二抗选择 已有2人参与
|
||
|
初次做免疫组化，一抗是neurofilament(神经丝蛋白NFM,兔多克隆抗体) 和 glial fibrillary acidic protein(神经胶质纤维酸性蛋白，GFAP,兔多克隆抗体)，荧光二抗分别选择什么？希望两种二抗一种标记绿荧光，另一种标记红荧光。 期待懂得人能指点一下！非常感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
明天应该可查了！？
已经有5人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有7人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
人气不行了
已经有10人回复
-
我面上完蛋了
已经有10人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有24人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有17人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：两种蛋白融合原核表达的问题
已经有15人回复
- 哪家公司的荧光二抗比较好啊
已经有6人回复
- 免疫荧光二抗的选择
已经有5人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- 免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗
已经有6人回复
- 免疫沉淀后进行western blot 应该有几条带？
已经有16人回复
- 真情求助：买的用于Western blot 的一抗能不能用来做免疫荧光或者免疫组化
已经有6人回复
- 求助- 这个免疫组化图可以用吗
已经有5人回复
- 细胞免疫荧光实验
已经有5人回复
- 免疫组化 求助啊！
已经有4人回复
- 免疫组化求助！检测小鼠肿瘤中的相关蛋白用鼠源的抗体不是很妥吗？
已经有6人回复
- 【求助】菜鸟自学 western blot 关于一抗 ，二抗
已经有5人回复
- 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗
已经有4人回复
- 我想看催乳素在鱼体内的分布，用什么方法，具体点···
已经有12人回复
- 关于一抗二抗杂交
已经有11人回复
- 【求助/交流】免疫荧光的问题 。。
已经有17人回复
- 【求助】急急急 如何在盐碱地开发这种方向中运用免疫组化技术
已经有10人回复
- 【求助】免疫组化
已经有13人回复
- 【求助/交流】免疫组化二抗的选择
已经有3人回复
- 【求助/交流】免疫组化时一抗二抗的选择
已经有4人回复
jiaolong11a
新虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 487.3
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 227
- 在线: 29.5小时
- 虫号: 1244690
- 注册: 2011-03-25
- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
【答案】应助回帖
★ ★
137167741: 金币+2, BioEPI+1, 鼓励交流~~ 2014-02-23 12:50:07
137167741: 金币+2, BioEPI+1, 鼓励交流~~ 2014-02-23 12:50:07
|
同样学习一下：二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。 |
4楼2014-02-21 09:15:01
jiaolong11a
新虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 487.3
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 227
- 在线: 29.5小时
- 虫号: 1244690
- 注册: 2011-03-25
- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
2楼2014-02-20 15:34:35
3楼2014-02-20 16:51:37
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17436
- 散金: 1682
- 红花: 121
- 沙发: 42
- 帖子: 14603
- 在线: 2203.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
5楼2014-02-21 10:53:40
6楼2014-02-21 11:04:09
7楼2014-02-21 11:04:16
8楼2014-02-21 11:35:38
jiaolong11a
新虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 487.3
- 红花: 5
- 沙发: 1
- 帖子: 227
- 在线: 29.5小时
- 虫号: 1244690
- 注册: 2011-03-25
- 性别: MM
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
137167741: 金币+3, 鼓励交流~~ 2014-02-23 12:50:26
137167741: 金币+3, 鼓励交流~~ 2014-02-23 12:50:26
|
不知道有帮助吗：在一些如胸腺、脾脏、血液的组织以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等细胞内，通常含有较多的Fc受体，这时候选择二抗时最好选择Anti-IgG, F（ab’）2 fragment这样的特异性二抗，这样就消除了由于Fc部分与IgG的非特异性结合。常规的Anti-IgG （H+L）二抗与IgG的重链和轻链都有结合反应，即与IgG的Fc的F（ab’）2片段都能结合；由于IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此Anti-IgG （H+L）与它们都有交叉反应。而Anti-IgG, F（ab’）2 fragment经过了IgG Fc片段的吸附，因此只与IgG的F（ab’）2片段结合，然而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此与它们也有交叉反应在一些特殊的实验里，只需要检测样本里的IgG或者IgM，常规的Anti-IgG （H+L）由于与IgG的重链和轻链都有结合反应，而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此不能特异性的检测某种类型的IgG或者IgM。这时候就需要针对特殊类型Ig分子的二抗。按照标记分，有HRP、AP、生物素等标记二抗，FITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等荧光二抗；按照检测物种分，有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG（Fc）、IgG（ab’）2等不同类型抗体 |
9楼2014-02-21 13:31:34
10楼2014-02-23 12:14:19
