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amand

新虫 (小有名气)

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[求助] 免疫组化，二抗选择已有2人参与

初次做免疫组化，一抗是neurofilament(神经丝蛋白NFM,兔多克隆抗体) 和 glial fibrillary acidic protein(神经胶质纤维酸性蛋白，GFAP,兔多克隆抗体)，荧光二抗分别选择什么？希望两种二抗一种标记绿荧光，另一种标记红荧光。
期待懂得人能指点一下！非常感谢！

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1楼 2014-02-20 15:06:43

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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
137167741: 金币+2, BioEPI+1, 鼓励交流~~ 2014-02-23 12:50:07

引用回帖:

3楼: Originally posted by amand at 2014-02-20 16:51:37
谢谢哈  这个我晓得的
我就是不知道我这两个一抗表面免疫球蛋白是啥  就是IgM  IgG这种分类
晓得这个才好选择二抗。
呵呵  免疫学  没有好好学
说的不对的地方  还请赐教！...

同样学习一下：二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。