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免疫组化 求助啊!
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免疫组化 求助啊!
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各路高手求助啊!
免疫组化实验我有一个是标记活细胞内的细胞器的,另外有一个一抗---二抗带荧光标记细菌的,这两个前面是绿光,后面的红光。后面的做的时候要用4%多聚甲醛固定,是不是要前面的先标记好了再把细胞固定了再标记后面的抗体?
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2013-01-09 16:16:13
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你要做共定位吧?看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中?仔细看看你的细胞器染料说明书,确定是不是必须活细胞才能染上,如果确定,那就先用染料处理细胞若干小时,再固定细胞,做免疫荧光
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2013-01-09 23:32:02
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Originally posted by
淘气肥猫
at 2013-01-09 23:32:02
你要做共定位吧?看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中?仔细看看你的细胞器染料说明书,确定是不是必须活细胞才能染上,如果确定,那就先用染料处理细胞若干小时,再固定细胞,做免疫荧光
是做共定位,细胞器确实是需要标记活的细胞。先用燃料处理,后面再做免疫荧光,会不会把燃料洗掉啊?
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3楼
2013-01-10 13:55:43
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不会,这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收,一旦结合上就很稳定,不会被洗掉的
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2013-01-11 10:47:56
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淘气肥猫
at 2013-01-11 10:47:56
不会,这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收,一旦结合上就很稳定,不会被洗掉的
谢谢!我已经试验过了,前天做的标记,昨天看了荧光还不错,呵呵
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5楼
2013-01-13 11:10:53
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