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【求助】两个实验问题,求牛人指教(细胞培养和免疫组化,赠金币)
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冰雪消融8959
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[交流]
【求助】两个实验问题,求牛人指教(细胞培养和免疫组化,赠金币)
1. 体外培养人的平滑肌细胞,用盐干预,盐浓度是多少?有没有相关文献??
2. 做大鼠的TGF_B1,做免疫组化,用的试剂是中衫和SANTA的,步骤是按说明书进行,为什么滴中兴树胶封片后没有显色,是什么原因啊??
各位师兄师姐帮帮忙啊,在下小硕,做实验头大啊,有价值的回复有金币赠送!!!
[
Last edited by amisking on 2010-11-10 at 19:02
]
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2010-11-10 02:00:52
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kuyuhuashi
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amisking(金币+2):good! 2010-11-10 19:02:23
冰雪消融8959(金币+5): 2010-11-11 18:39:00
1.这个浓度问题一定要有依据。
2.IHC不都是专人指导吗?没显色,抗原修复了吗?二抗加了吗?染色了吗?还是封片子封到背面去了?
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2010-11-10 02:24:50
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冰雪消融8959(金币+1): 2010-11-11 18:40:02
还是封片子封到背面去了? [/quote]
这种事情我干过。。。。
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4楼
2010-11-10 08:26:59
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kuyuhuashi
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冰雪消融8959(金币+1): 2010-11-11 18:40:09
我以前在病理科时,下午一屋子人都再看片子,鸦雀无声,突然有个新手说“这张不对,咋都糊了呢?”,急奔至教授处。教授曰:“盖反了”
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2010-11-10 09:40:37
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冰雪消融8959
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引用回帖:
Originally posted by
kuyuhuashi
at 2010-11-10 02:24:50:
1.这个浓度问题一定要有依据。
2.IHC不都是专人指导吗?没显色,抗原修复了吗?二抗加了吗?染色了吗?还是封片子封到背面去了?
谢谢答复,问题1能不能给出几篇相关的参考文献啊?
问题2一抗二抗都加了,BAB染色,封片正确,还是不显色,还可能是那些原因啊?
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7楼
2010-11-11 18:38:39
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kuyuhuashi
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冰雪消融8959(金币+4): 2010-11-13 00:38:03
问题1能不能给出几篇相关的参考文献啊?
问题2一抗二抗都加了,BAB染色,封片正确,还是不显色,还可能是那些原因啊?
----------
1.文献最好还是你自己结合研究方向和实验目的扩大范围查一下。
2.如果上述得可能都排除了,那就是一个假阴性结果。最大的可能是抗原修复这个环节出了问题。如果是高温修复的话一定要掐准温度和时间;微波修复比较复杂,我就搞不清了,这里面窍门很多。建议你直接咨询本城市免疫组化做得最有经验的技师。
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2010-11-11 23:34:04
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冰雪消融8959(金币+4): 2010-11-16 15:35:28
1、浓度要根据你做的研究方向去查相类似的文献来参考
2。你可以考虑是否在封片前真的染色了,你在bab染色后复染了吗?bab染色的时间与室温、组织等都有关系
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2010-11-14 08:26:51
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2010-11-10 10:16
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