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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 【求助】两个实验问题，求牛人指教（细胞培养和免疫组化，赠金币）
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冰雪消融8959

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助】两个实验问题，求牛人指教（细胞培养和免疫组化，赠金币）

1．        体外培养人的平滑肌细胞，用盐干预，盐浓度是多少？有没有相关文献？？
2．        做大鼠的TGF_B1，做免疫组化，用的试剂是中衫和SANTA的，步骤是按说明书进行，为什么滴中兴树胶封片后没有显色，是什么原因啊？？

各位师兄师姐帮帮忙啊，在下小硕，做实验头大啊，有价值的回复有金币赠送！！！

[ Last edited by amisking on 2010-11-10 at 19:02 ]
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1楼2010-11-10 02:00:52
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kuyuhuashi

金虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2):good！ 2010-11-10 19:02:23
冰雪消融8959(金币+5): 2010-11-11 18:39:00
1.这个浓度问题一定要有依据。
2.IHC不都是专人指导吗？没显色，抗原修复了吗？二抗加了吗？染色了吗？还是封片子封到背面去了？
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2楼2010-11-10 02:24:50
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catherine_

木虫 (正式写手)
冰雪消融8959(金币+1): 2010-11-11 18:40:02
还是封片子封到背面去了？ [/quote]


这种事情我干过。。。。
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4楼2010-11-10 08:26:59
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kuyuhuashi

金虫 (著名写手)
冰雪消融8959(金币+1): 2010-11-11 18:40:09
我以前在病理科时，下午一屋子人都再看片子，鸦雀无声，突然有个新手说“这张不对，咋都糊了呢？”，急奔至教授处。教授曰：“盖反了”
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5楼2010-11-10 09:40:37
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冰雪消融8959

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by kuyuhuashi at 2010-11-10 02:24:50:
1.这个浓度问题一定要有依据。
2.IHC不都是专人指导吗？没显色，抗原修复了吗？二抗加了吗？染色了吗？还是封片子封到背面去了？

谢谢答复，问题1能不能给出几篇相关的参考文献啊？

问题2一抗二抗都加了，BAB染色，封片正确，还是不显色，还可能是那些原因啊？
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7楼2010-11-11 18:38:39
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kuyuhuashi

金虫 (著名写手)
冰雪消融8959(金币+4): 2010-11-13 00:38:03
问题1能不能给出几篇相关的参考文献啊？

问题2一抗二抗都加了，BAB染色，封片正确，还是不显色，还可能是那些原因啊？

----------
1.文献最好还是你自己结合研究方向和实验目的扩大范围查一下。
2.如果上述得可能都排除了，那就是一个假阴性结果。最大的可能是抗原修复这个环节出了问题。如果是高温修复的话一定要掐准温度和时间；微波修复比较复杂，我就搞不清了，这里面窍门很多。建议你直接咨询本城市免疫组化做得最有经验的技师。
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8楼2010-11-11 23:34:04
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汤雨影

铁虫 (小有名气)
冰雪消融8959(金币+4): 2010-11-16 15:35:28
1、浓度要根据你做的研究方向去查相类似的文献来参考
2。你可以考虑是否在封片前真的染色了，你在bab染色后复染了吗？bab染色的时间与室温、组织等都有关系
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9楼2010-11-14 08:26:51
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我非我亦我3楼
2010-11-10 08:01   回复  
祝福祝福
luqi01146楼
2010-11-10 10:16   回复  
amisking:专业讨论帖，不要纯表！ 2010-11-10 19:02:37
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