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铁虫 (初入文坛)

[交流] 免疫组化 求助啊! 已有1人参与

各路高手求助啊!
    免疫组化实验我有一个是标记活细胞内的细胞器的,另外有一个一抗---二抗带荧光标记细菌的,这两个前面是绿光,后面的红光。后面的做的时候要用4%多聚甲醛固定,是不是要前面的先标记好了再把细胞固定了再标记后面的抗体?
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淘气肥猫

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你要做共定位吧?看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中?仔细看看你的细胞器染料说明书,确定是不是必须活细胞才能染上,如果确定,那就先用染料处理细胞若干小时,再固定细胞,做免疫荧光
2楼2013-01-09 23:32:02
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tsllts

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 淘气肥猫 at 2013-01-09 23:32:02
你要做共定位吧?看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中?仔细看看你的细胞器染料说明书,确定是不是必须活细胞才能染上,如果确定,那就先用染料处理细胞若干小时,再固定细胞,做免疫荧光

是做共定位,细胞器确实是需要标记活的细胞。先用燃料处理,后面再做免疫荧光,会不会把燃料洗掉啊?
3楼2013-01-10 13:55:43
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淘气肥猫

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不会,这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收,一旦结合上就很稳定,不会被洗掉的
4楼2013-01-11 10:47:56
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tsllts

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 淘气肥猫 at 2013-01-11 10:47:56
不会,这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收,一旦结合上就很稳定,不会被洗掉的

谢谢!我已经试验过了,前天做的标记,昨天看了荧光还不错,呵呵
5楼2013-01-13 11:10:53
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