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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 免疫组化 求助啊！
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tsllts

铁虫 (初入文坛)

[交流] 免疫组化 求助啊！ 已有1人参与

各路高手求助啊！
    免疫组化实验我有一个是标记活细胞内的细胞器的，另外有一个一抗---二抗带荧光标记细菌的，这两个前面是绿光，后面的红光。后面的做的时候要用4%多聚甲醛固定，是不是要前面的先标记好了再把细胞固定了再标记后面的抗体？
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1楼 2013-01-09 16:16:13
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淘气肥猫

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不会，这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收，一旦结合上就很稳定，不会被洗掉的
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4楼2013-01-11 10:47:56
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淘气肥猫

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你要做共定位吧？看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中？仔细看看你的细胞器染料说明书，确定是不是必须活细胞才能染上，如果确定，那就先用染料处理细胞若干小时，再固定细胞，做免疫荧光
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2楼2013-01-09 23:32:02
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铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 淘气肥猫 at 2013-01-09 23:32:02
你要做共定位吧？看你的蛋白是不是存在于某个细胞器中？仔细看看你的细胞器染料说明书，确定是不是必须活细胞才能染上，如果确定，那就先用染料处理细胞若干小时，再固定细胞，做免疫荧光

是做共定位，细胞器确实是需要标记活的细胞。先用燃料处理，后面再做免疫荧光，会不会把燃料洗掉啊？
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3楼2013-01-10 13:55:43
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tsllts

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 淘气肥猫 at 2013-01-11 10:47:56
不会，这类小分子染料只是需要活细胞将其吸收，一旦结合上就很稳定，不会被洗掉的

谢谢！我已经试验过了，前天做的标记，昨天看了荧光还不错，呵呵
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5楼2013-01-13 11:10:53
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