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20100136

铜虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】急问~~~免疫组化 蛋白最低检测限

请教大家有关“免疫组织化学”方面的问题

实验设计:有两种蛋白,通过尾静脉注射入小鼠体内后,取组织,采用免疫组化的方法检测两种蛋白在同一组织的分布多少,最好能对比两种蛋白在组织的分布量。

问题:免疫组化的检测原理应该是抗原抗体相互结合吧,那最低蛋白检测限是多少呢?这决定了尾静脉注射的蛋白剂量,我担心如果注射得太多,可能会导致免疫组化的结果黑乎乎一片,显示不出两种蛋白的差别来。

没有查到相关文献,有经验或是用相关文献的同志们帮帮忙啊!
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20100136

铜虫 (初入文坛)


有这方面经验的虫友吗?指点下吧~~谢谢哦
2楼2011-01-25 08:42:33
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zhp1984816

铜虫 (初入文坛)



20100136(金币+1): 2011-01-25 11:25:56
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流 2011-01-27 08:24:22
这个应该不会,你的抗体好用的话,是和抗原特异性结合的,你的抗原蛋白只有量底检测不到,一般不会因为量高而造成背景高,背景高很多时候是因为抗体特异性不好,比如多抗之类的,容易背景高,和你的抗原浓度应该关系不大。
3楼2011-01-25 11:15:20
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20100136

铜虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by zhp1984816 at 2011-01-25 11:15:20:
这个应该不会,你的抗体好用的话,是和抗原特异性结合的,你的抗原蛋白只有量底检测不到,一般不会因为量高而造成背景高,背景高很多时候是因为抗体特异性不好,比如多抗之类的,容易背景高,和你的抗原浓度应该关 ...

那注射的蛋白剂量大体在什么范围比较合适呢? 1mg/只 可以吗?还是应该设计浓度梯度呢?
4楼2011-01-25 11:28:32
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nician

新虫 (初入文坛)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励新虫参与交流 2011-01-27 08:25:03
如果可以的话 最好做个梯度
不光是你蛋白注射的量的梯度
一抗的浓度也做个梯度
从中筛选出个合适的来
5楼2011-01-27 02:26:45
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