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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】急问~~~免疫组化 蛋白最低检测限
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20100136

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】急问~~~免疫组化 蛋白最低检测限

请教大家有关“免疫组织化学”方面的问题

实验设计：有两种蛋白，通过尾静脉注射入小鼠体内后，取组织，采用免疫组化的方法检测两种蛋白在同一组织的分布多少，最好能对比两种蛋白在组织的分布量。

问题：免疫组化的检测原理应该是抗原抗体相互结合吧，那最低蛋白检测限是多少呢？这决定了尾静脉注射的蛋白剂量，我担心如果注射得太多，可能会导致免疫组化的结果黑乎乎一片，显示不出两种蛋白的差别来。

没有查到相关文献，有经验或是用相关文献的同志们帮帮忙啊！
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1楼 2011-01-24 14:59:19
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20100136

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zhp1984816 at 2011-01-25 11:15:20:
这个应该不会，你的抗体好用的话，是和抗原特异性结合的，你的抗原蛋白只有量底检测不到，一般不会因为量高而造成背景高，背景高很多时候是因为抗体特异性不好，比如多抗之类的，容易背景高，和你的抗原浓度应该关 ...

那注射的蛋白剂量大体在什么范围比较合适呢? 1mg/只 可以吗？还是应该设计浓度梯度呢？
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4楼2011-01-25 11:28:32
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20100136

铜虫 (初入文坛)
有这方面经验的虫友吗？指点下吧~~谢谢哦
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2楼2011-01-25 08:42:33
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zhp1984816

铜虫 (初入文坛)
★
20100136(金币+1): 2011-01-25 11:25:56
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流 2011-01-27 08:24:22
这个应该不会，你的抗体好用的话，是和抗原特异性结合的，你的抗原蛋白只有量底检测不到，一般不会因为量高而造成背景高，背景高很多时候是因为抗体特异性不好，比如多抗之类的，容易背景高，和你的抗原浓度应该关系不大。
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3楼2011-01-25 11:15:20
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nician

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励新虫参与交流 2011-01-27 08:25:03
如果可以的话 最好做个梯度
不光是你蛋白注射的量的梯度
一抗的浓度也做个梯度
从中筛选出个合适的来
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5楼2011-01-27 02:26:45
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