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l找牛奶

金虫 (初入文坛)

[求助] 求助: 使用western blot 法测定特定组织中酶蛋白的表达 已有1人参与

如题, 本虫为非药理学专业, 现想要测定一个提取物连续给药对大鼠组织中酶蛋白表达的影响。
因为从前没有做过,本实验室内也没有经验,特此发帖求助。
大概学习了一下,应该需要在电泳蛋白质分离后使用一抗、二抗标记,染色后分析条带灰度。
但是不明白几个事情:
1.需要准备哪一种试剂盒,怎样选择试剂盒?
2.在哪几步中会用到试剂盒?
3.组织在取样后应该怎样冷冻?必须用液氮冷冻吗?

总之,将实验看下来一遍,还有很多不清楚,至少先弄明白试剂盒的选购和组织样品的收集吧!
麻烦大家了,谢谢^^!
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stayhungry,stayfoolish
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l找牛奶

金虫 (初入文坛)

自顶自顶,求扫盲——
stayhungry,stayfoolish
2楼2015-04-14 18:33:54
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小小逍遥人

金虫 (正式写手)

张斌猪

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
就前面要个蛋白提取试剂盒,后面其他都是有公司配套的  ,主要是一抗的选择比较重要!没必要冰冻!其实放-20足够了 !
生命还需要奇迹来衬托
3楼2015-04-21 00:09:13
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大聪大聪

新虫 (初入文坛)

回复第三问:组织取样应该在冰上操作,剪取适合大小的组织后用锡箔纸包起来,然后迅速丢入液氮或-80度的冰箱中。如果没有液氮,也可以暂时取好组织后放在冰箱-20度保存一会,最后一起放入-80的冰箱。
顺便把我们实验室的Western Blot的操作流程发给你。

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  • 2016-01-24 10:00:03, 23.91 K
4楼2016-01-24 10:00:09
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我爱大药学

新虫 (小有名气)

5楼2016-03-19 18:43:35
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