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pcr反应cytb序列扩不出原因？求分析！ 已有2人参与
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本人本科生，目前做书虱的种内鉴定。之前用引物扩增ITS序列，电泳出现条带，但是送去公司检测，说亮带里有比较乱，无法测序。现在用引物扩增cytb序列，发现没有条带。 试剂 ddh2o 31.5ul dNTP 4ul buffer(Mg2+) 5ul 引物1 1.5ul 4个ep管分装 每个ep12.5ul 引物2 1.5ul taq酶 0.5ul 模板 6ul （之前老师也做过几次，同样没有条带）退火温度为40.0 41.2 43.9 47.7 52.6 56.5 58.8 60.0“℃。 模板有一年了，但是its 有条带，很亮，只是无法测序。用新的模板可以扩出很亮的条带（cytb）。想求助是不是模板的问题. cytb: F TATGTACTACCATGAGGACAAATAT R ATTACACCTCCTAATTATTAGGAAT |
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5楼2015-04-10 10:13:13
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