| 查看: 2345 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
SDS-PAGE图求分析 已有6人参与
|
||
|
图中是放线菌菌体破碎上清的SDS-PAGE图，样品最终是用来跑双向的，所以为了减少蛋白降解提高蛋白溶出率，用了不同的细胞裂解方法和几种不同的裂解液，结果如图所示。 A/B/C/D所用裂解液：Tris-HCl 50mM pH7.4, protease inhibitor cocktail E:Tris-HCl 50mM pH7.4, protease inhibitor cocktail, 8M 尿素 F：Tris-HCl 50mM pH7.4, protease inhibitor cocktail， 7M尿素，2M硫脲 G：Tris-HCl 50mM pH7.4, protease inhibitor cocktail，2%SDS（终浓度，SDS细胞破碎后加，65℃处理10min） 细胞破碎方法：A涡旋振荡，B超声，CDEFG机械均质 想请教高手几个问题 1、用SDS处理后的样品蛋白胶为什么会跑成这样？上面大分子量的蛋白全没了，下面糊成一片？做过不加SDS进行65℃处理，虽然蛋白有一定程度降解，但大分子量的蛋白条带还是有的，说明不是高温造成的结果。不知道样品中过量的SDS对跑胶有没有什么影响？ 2、尿素和硫脲对SDS-PAGE是不是也有影响？因为加了尿素和硫脲的样品蛋白胶颜色反而不如不加的，但是蛋白浓度测定（Bradford法和BCA法都测过）结果显示加了尿素和硫脲的蛋白浓度较高，是不是尿素和硫脲对Bradford法和BCA法都有干扰（硫脲对BCA有干扰是确定的）？ 3、蛋白胶每次跑出来下面小分子量部分都没有清晰的条带，而是糊成一片的，这是什么原因？  IMG_0578_副本.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
总分293求调剂
已经有3人回复
-
生物技术与工程
已经有3人回复
-
299求调剂
已经有9人回复
-
材料学硕，求调剂
已经有8人回复
-
284求调剂
已经有14人回复
-
292求调剂
已经有4人回复
-
287求调剂
已经有11人回复
-
086003食品工程求调剂
已经有6人回复
-
295求调剂
已经有8人回复
-
考研化学308分求调剂
已经有11人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 怎么分析电泳胶图
已经有8人回复
- sds-page跑电泳Marker为什么只跑出四条带
已经有6人回复
- sds-page 凝胶电泳求助 只有marker条带是清晰的，但宽窄不一
已经有18人回复
- 怎么才能得到外文文献中的SDS-PAGE 电泳图片？？？
已经有28人回复
- sds-page的实验目的，数据分析？
已经有3人回复
- 求助SDS-PAGE分析蛋白表达量（百分比含量）
已经有6人回复
- Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析，
已经有15人回复
- 求MALDI TOF 质谱专家帮忙分析下谱图，万分感谢
已经有5人回复
- 核酸电泳图求分析
已经有36人回复
- SDS-PAGE电泳图这样算成功吗？
已经有13人回复
- SDS-PAGE结果求分析原因
已经有23人回复
- SDS-PAGE电泳图条带分析
已经有19人回复
- SDS-PAGE电泳图像与问题分析
已经有7人回复
- SDS-PAGE电泳样品及MARKER跑不开
已经有6人回复
- 帮忙分析SDSPAGE问题
已经有5人回复
- SDS-PAGE凝胶电泳跑牛血红蛋白
已经有5人回复
- SDS-PAGE跑得很难看，请高手分析
已经有11人回复
- SDS-PAGE定量分析
已经有4人回复
- 请大家帮忙看看我的蛋白电泳图，谢谢大家了
已经有10人回复
- 蛋白质sds-page电泳图分析
已经有24人回复
- FTIR图谱分析疑问
已经有9人回复
- 请大家帮忙分析下我的SDS-PAGE蛋白检测胶啊
已经有26人回复
- 关于SDS-PAGE电泳问题
已经有12人回复
5楼2015-04-08 19:28:51
2楼2015-04-08 14:18:52
3楼2015-04-08 16:02:16
4楼2015-04-08 19:20:50
40