24小时热门版块排行榜    

查看: 1492  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1277749856

新虫 (初入文坛)

[求助] 请PCR的问题 已有7人参与

大家好,我现在做普通PCR,跑电泳的结果一直不理想,希望大家给些意见,希望早点做出结果的,谢谢啦

体系(25μL)
ddH2O          12
primer1         5
primer2         5
2×buffer      62.5
Taq 酶           0.5
dNTP             10
模板              5
                            A               B                     C                  D
镁离子                  0              0.5                  1                  1.5
ddH20                  5              4.5                   4                 3.5
附件图片中温度为55摄氏度,已经做了54,55,56,57,60的退火温度,但结果一直都是这样,区别不大。

请PCR的问题
IMG_20150401_210152.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意三楼。。25ul是怎么算的
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-04-07 08:53:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

ytt577313693

新虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-04-07 22:56:00
我最近做PCR也会出现这样的拖带现象,我是做的梯度,慢慢试的退火温度,可能是引物的特异性不好,你把温度降低点。再试试我已经降到46度了。你可以往低调。我的师兄说可以降到40左右。如果出现目的条带可以回收胶再跑那样图就好看了。
2楼2015-04-05 21:13:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我怎么也看懂你的PCR体系啊?是25uL吗?我算不清楚…

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
3楼2015-04-05 22:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1277749856

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-04-05 22:40:01
我怎么也看懂你的PCR体系啊?是25uL吗?我算不清楚…

是呀,我做的是镁离子的梯度,做了四管
5楼2015-04-07 08:53:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 15/750 2026-03-02 18:47 by caszguilin
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-02 7/350 2026-03-02 18:46 by caszguilin
[考研] 275求调剂 +6 明远求学 2026-03-01 6/300 2026-03-02 18:40 by caszguilin
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +4 awaystay 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:33 by yeahyou
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +6 pin8023 2026-02-28 8/400 2026-03-02 17:13 by 0854蹲调剂
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 14/700 2026-03-02 16:09 by 今夏不夏
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考博] 诚招农业博士 +3 心欣向荣 2026-02-28 3/150 2026-03-02 13:33 by 时间不狗
[考研] 272求调剂 +7 材紫有化 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:48 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 295求调剂 +8 19171856320 2026-02-28 8/400 2026-03-02 11:19 by yuchj
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪!?!
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见