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大神请进,定量PCR的阈值问题已有3人参与
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| 我发现阈值调高调低,最终的基因拷贝数会有很大的变化啊。那么阈值到底应该是以什么标准来调整?到多少合适? |
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atlanticwi
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2楼2014-03-07 10:16:42
wangweijian
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西瓜
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【答案】应助回帖
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| 让软件自动选就可以了,一般是第3到第15个循环的荧光信号的标准偏差的十倍。手动调的话,当然不可能去算那个标准差,只要选在指数扩增开始阶段就好了。虽然调整阈值会让Ct值也跟着变动,但这个变化是所有的Ct值都跟着变的,各个Ct值之间的差异还是一样的。也就是说,只要阈值设置是在指数扩增区,调大点或者小点,最终的定量结果是差不多的。 |
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4楼2014-03-08 00:51:20
lvbobo823
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g0945111
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