24小时热门版块排行榜    

查看: 5216  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

圣迭戈

铜虫 (小有名气)

[求助] 大神请进,定量PCR的阈值问题 已有3人参与

我发现阈值调高调低,最终的基因拷贝数会有很大的变化啊。那么阈值到底应该是以什么标准来调整?到多少合适?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

g0945111

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2014-03-08 00:51:20
让软件自动选就可以了,一般是第3到第15个循环的荧光信号的标准偏差的十倍。手动调的话,当然不可能去算那个标准差,只要选在指数扩增开始阶段就好了。虽然调整阈值会让Ct值也跟着变动,但这个变化是所有的Ct值都跟 ...

可是我还是有个问题,那既然阈值可以调-这样对应的Ct值就会不同,出来的定量结果就会不一样,我们最终定量的意义不就在于看看这个模板到底有多少拷贝数,这个值肯定是一定的呀。那我们出来的结果怎么对比,是说多少个循环对应下的它的拷贝数是多少这样来比较么?若果所有的机器每次设定的阈值一个定值这个结果就确实有可比性,但这个可能性不大吧,每个设定的阈值是不一样的。求赐教这个问题!谢谢
7楼2016-09-13 10:51:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

............
    这个东西一般机子会自己根据公式来算,你最好不要自己调着玩.............
Let God do with it as He wills
2楼2014-03-07 10:16:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
圣迭戈: 金币+10, 有帮助 2014-03-16 10:27:57
高于荧光背景信号,也就是对数增长期刚开始时。
3楼2014-03-07 12:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-08 09:34:14
圣迭戈: 金币+50, ★★★很有帮助 2014-03-16 10:27:19
让软件自动选就可以了,一般是第3到第15个循环的荧光信号的标准偏差的十倍。手动调的话,当然不可能去算那个标准差,只要选在指数扩增开始阶段就好了。虽然调整阈值会让Ct值也跟着变动,但这个变化是所有的Ct值都跟着变的,各个Ct值之间的差异还是一样的。也就是说,只要阈值设置是在指数扩增区,调大点或者小点,最终的定量结果是差不多的。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2014-03-08 00:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295求调剂 +3 一志愿京区211 2026-03-18 5/250 2026-03-18 17:03 by zhaoqian0518
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +7 rare12345 2026-03-18 7/350 2026-03-18 14:31 by laoshidan
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +16 不知道叫什么! 2026-03-15 18/900 2026-03-17 17:05 by ruiyingmiao
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 8/400 2026-03-17 16:57 by ruiyingmiao
[考研] 材料与化工专硕调剂 +5 heming3743 2026-03-16 5/250 2026-03-17 14:03 by 勇敢太监王公公
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
信息提示
请填处理意见