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向光生长

禁虫 (知名作家)

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匿名

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★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-02 23:32:58
向光生长: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-06-15 10:08:53
本帖仅楼主可见
22楼2015-04-02 12:57:16
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小小cool

金虫 (正式写手)

因为你22度已经连好了,不需要连了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2015-04-02 07:35:36
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ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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向光生长: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-06-15 10:11:05
放置过夜需要看你的酶,你的样品有附带说明怎么使用的。
我们这边用的酶是16度过夜,不确定你们的。
下次好好看产品使用说明上面基本都有。


最后连好没有跑电泳看,根据大小来看。
如果你链接的一个太小电泳难以分辨的话,就测序。

祝你好运
12楼2015-04-02 08:20:58
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yuman0709

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


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向光生长: 金币+1 2015-06-15 10:11:21
22度  1h  时间那么短,能连接好吗?你得到的阳性克隆多不多?我们都是20度  4h  或16度  过夜
14楼2015-04-02 10:00:07
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)


【答案】应助回帖


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向光生长: 金币+1, 有帮助 2015-06-15 10:12:14
16度过夜,我用生工的

[ 发自小木虫客户端 ]
23楼2015-04-02 13:16:44
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小小cool

金虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by ejdwwb at 2015-04-02 12:57:16
已经连好的,最好放在4度过夜。在4度是,T4连接酶仍然有一些活性,最主要的是,连好的片段在4度更稳定。

同意,我就是这个意思,连接的过程其实是一个动态平衡

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
24楼2015-04-02 13:25:05
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Sunshine092

木虫 (小有名气)

我们这边用的是两个公司的连接酶,Thermo的是22° 1h,Takara的是4°过夜。
27楼2015-04-03 17:44:04
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itsucks

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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其实4°或者室温都可以 我们老师喜欢室温放 我们学生喜欢4°放 都没有问题啊
29楼2015-04-04 09:18:21
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普通回帖

小小cool

金虫 (正式写手)

四度比较好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-04-01 23:15:22
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


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向光生长: 金币+1, 有帮助 2015-06-15 10:09:35
我喜欢4度过夜。也有人16度的吧。
向钱看,向厚赚
3楼2015-04-01 23:17:08
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781055707

木虫 (著名写手)

16度

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
采菊东篱下,悠然见南山。
4楼2015-04-01 23:45:54
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向光生长

禁虫 (知名作家)

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5楼2015-04-02 00:17:13
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向光生长

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6楼2015-04-02 00:17:58
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7楼2015-04-02 00:18:40
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mr.clutch

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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向光生长: 金币+1, 有帮助 2015-06-15 10:09:54
我们 实验室一直都是16℃连接

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-04-02 00:27:02
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向光生长

禁虫 (知名作家)

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