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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 酿酒酵母EBY00诱导前培养问题
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牙牙豆

新虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母EBY00诱导前培养问题 已有2人参与

大家好，我要做酵母表面展示，已把目的基因转入EBY100，现在要看最佳诱导时间。
按照方法讲诱导之前先挑取单菌落于YNB－CAA＋2%葡萄糖的培养基（我加了10ul 100mg/LAmp,想抑制细菌生长）中，30度过夜摇至OD600在2—5之间再收集菌体，再用含半乳糖的YNB－CAA培养。
现在我的问题来了
我摇了一天，OD值还是达不到2，一直在1.2左右，下午于是收集菌体又换了新鲜的培养基，半天过去了（约6个小时），依然不到2，就明白是怎么回事了，唉～～
求大神指导～
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1楼 2015-04-01 20:42:40
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定用对培养基了吗？

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2楼2015-04-01 22:31:24
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牙牙豆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-04-01 22:31:24
你确定用对培养基了吗？

确定用对了的，不晓得是不是菌的活力不好咋的～已重接，谢谢哈！
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3楼2015-04-02 18:44:44
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 牙牙豆 at 2015-04-02 18:44:44
确定用对了的，不晓得是不是菌的活力不好咋的～已重接，谢谢哈！...

不知道你现在的情况如何，如果重复不好，建议更换或者重新配置培养基。。。
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4楼2015-08-26 10:27:56
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)
EBY100换吗
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5楼2017-01-05 21:57:44
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shxteacher

铁杆木虫 (正式写手)
你好，能否给我一点EBY100菌株？
我是做毕赤酵母表达系统的，或者你需要毕赤酵母的东西，我们可以交换，谢谢！
我的邮箱是yishengyouni1266@sina.com
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OMG
6楼2017-01-11 09:29:41
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薄荷西红柿

新虫 (初入文坛)
你好，我在做EBY100的展示，现在只是做感受态的阶段，我们的菌种很久了，我划线和涂布EBY100，30度，划线的两天没长，涂的长了，挑取单菌落接种10mlypd（酵母提取物，胰蛋白胨，葡萄糖），摇了18h后菌液是淡黄色，里面均匀悬浮小颗粒，并没有呈现乳白色，我的疑惑是，怎样鉴定菌液是EBY100，这样状态不好的菌是否需要重新再接瓶多活化几次。如果有时间希望可以回复我，谢谢。
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7楼2018-05-31 15:43:44
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雁雁是研究生

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 薄荷西红柿 at 2018-05-31 15:43:44
你好，我在做EBY100的展示，现在只是做感受态的阶段，我们的菌种很久了，我划线和涂布EBY100，30度，划线的两天没长，涂的长了，挑取单菌落接种10mlypd（酵母提取物，胰蛋白胨，葡萄糖），摇了18h后菌液是淡黄色，里 ...

你有转化了吗？？请问你用的筛选平板是什么呢？

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8楼2018-06-06 16:54:23
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我张怀民

新虫 (初入文坛)
我摇了两天OD都没有到1怎么回事

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9楼2022-05-16 15:09:56
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