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牙牙豆

新虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母EBY00诱导前培养问题 已有2人参与

大家好,我要做酵母表面展示,已把目的基因转入EBY100,现在要看最佳诱导时间。
按照方法讲诱导之前先挑取单菌落于YNB-CAA+2%葡萄糖的培养基(我加了10ul 100mg/LAmp,想抑制细菌生长)中,30度过夜摇至OD600在2—5之间再收集菌体,再用含半乳糖的YNB-CAA培养。
现在我的问题来了
我摇了一天,OD值还是达不到2,一直在1.2左右,下午于是收集菌体又换了新鲜的培养基,半天过去了(约6个小时),依然不到2,就明白是怎么回事了,唉~~
求大神指导~
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定用对培养基了吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-04-01 22:31:24
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牙牙豆

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-04-01 22:31:24
你确定用对培养基了吗?

确定用对了的,不晓得是不是菌的活力不好咋的~已重接,谢谢哈!
3楼2015-04-02 18:44:44
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yuzaiyutian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 牙牙豆 at 2015-04-02 18:44:44
确定用对了的,不晓得是不是菌的活力不好咋的~已重接,谢谢哈!...

不知道你现在的情况如何,如果重复不好,建议更换或者重新配置培养基。。。
4楼2015-08-26 10:27:56
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菜头Q

铜虫 (初入文坛)

EBY100换吗
5楼2017-01-05 21:57:44
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shxteacher

铁杆木虫 (正式写手)

你好,能否给我一点EBY100菌株?
我是做毕赤酵母表达系统的,或者你需要毕赤酵母的东西,我们可以交换,谢谢!
我的邮箱是yishengyouni1266@sina.com
OMG
6楼2017-01-11 09:29:41
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薄荷西红柿

新虫 (初入文坛)

你好,我在做EBY100的展示,现在只是做感受态的阶段,我们的菌种很久了,我划线和涂布EBY100,30度,划线的两天没长,涂的长了,挑取单菌落接种10mlypd(酵母提取物,胰蛋白胨,葡萄糖),摇了18h后菌液是淡黄色,里面均匀悬浮小颗粒,并没有呈现乳白色,我的疑惑是,怎样鉴定菌液是EBY100,这样状态不好的菌是否需要重新再接瓶多活化几次。如果有时间希望可以回复我,谢谢。
7楼2018-05-31 15:43:44
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雁雁是研究生

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 薄荷西红柿 at 2018-05-31 15:43:44
你好,我在做EBY100的展示,现在只是做感受态的阶段,我们的菌种很久了,我划线和涂布EBY100,30度,划线的两天没长,涂的长了,挑取单菌落接种10mlypd(酵母提取物,胰蛋白胨,葡萄糖),摇了18h后菌液是淡黄色,里 ...

你有转化了吗??请问你用的筛选平板是什么呢?

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-06-06 16:54:23
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我张怀民

新虫 (初入文坛)

我摇了两天OD都没有到1怎么回事

发自小木虫IOS客户端
9楼2022-05-16 15:09:56
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